細胞系包裹收到后，請按下列方法操作。
①培養(yǎng)基：complete growth medium: Minimum essential medium (Eagle) with 2 mM L-glutamine and Earle's BSS adjusted to contain 1.5 g/L sodium bicarbonate, 0.1 mM non-essential amino acids, and 1.0 mM sodium pyruvate, 90%; fetal bovine serum, 10% ,Temperature: 25-28C 如果沒有CO2培養(yǎng)箱，培養(yǎng)基中需加入5克/升HEPES。
②。瓶內含5%FBS，請補加至10%FBS
一．貼壁細胞
1．嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
2．將細胞培養(yǎng)瓶內50ml培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（此培養(yǎng)基可再用）。
3．加入消化液1～1.5ml，37℃消化直到細胞脫落。
4．換新的細胞培養(yǎng)瓶，加入步驟2的培養(yǎng)基8ml，再在28℃，5％CO2下培養(yǎng)。
二．懸浮細胞
1．嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
2．將細胞培養(yǎng)瓶內50ml培養(yǎng)基用吸管移到離心管中。（嚴禁直接傾倒）
3．在1000rpm，10min離心。
4．將上清吸到另一無菌容器中，（此培養(yǎng)基可再用）。
5．對沉淀用步驟4的培養(yǎng)基再懸浮。
6．換新的細胞培養(yǎng)瓶，加入細胞培養(yǎng)瓶，在25℃，5％CO2下培養(yǎng)。
三．半貼壁細胞
1．參照上述1、2操作。
四．二毫升小管操作方法 小管內也是此細胞。
1．此管內細胞濃度在1-5 X 105個，將24孔克隆板的一排6孔每孔內加1毫升培養(yǎng)基；
2．將小管無菌開啟，細胞吸入第1孔內，倍比稀釋至2孔，再倍比稀釋至3孔，最后至6孔；
3．在25℃，5％CO2下培養(yǎng)，1周內應有某孔至細胞生長至對數(shù)生長期，取出細胞至T-25細胞培養(yǎng)瓶，常規(guī)培養(yǎng)。
