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人胚腎細(xì)胞
    人胚腎細(xì)胞
  • 平臺編號:bio-138356
  • 細(xì)胞信息: Lenti-X293T
  • 規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
  • 用途:STR鑒定正確
  • 服務(wù)費(fèi)用:
    加載中……
  • 訂購
  • 注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn))

 細(xì)胞介紹

 
HEK-293T細(xì)胞是293T(293tsA1609neo)細(xì)胞系(ATCC CRL-11268)的衍生物。細(xì)胞持續(xù)表達(dá)SV40抗原,該細(xì)胞常用于轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),轉(zhuǎn)染效率較高。(轉(zhuǎn)染一般以50%密度鋪板,待細(xì)胞剛剛貼到皿壁上后(一般8-10小時(shí)),即可進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作)。
 
細(xì)胞特性
 
1) 來源:人胚胎腎臟
 
2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長,貼壁能力較弱
 
3) 含量:>1x10^6  細(xì)胞數(shù)
 
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
 
5) 用途:僅供科研使用。
 
運(yùn)輸和保存
 
干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞
 
(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
 
(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
 
細(xì)胞接收后的處理
 
1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
 
2)請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
 
3)半貼細(xì)胞和貼壁不牢(懸浮)細(xì)胞:該細(xì)胞貼壁不是很牢,運(yùn)輸過程中會有部分細(xì)胞飄起或者成團(tuán),屬于正?,F(xiàn)象,收到細(xì)胞后請先放培養(yǎng)箱穩(wěn)定 2-4h 后再拍照留檔,密度大于 80%時(shí)再進(jìn)行處理,處理時(shí),離心上清,將上清中的細(xì)胞一同收集處理即可。
 
4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。
 
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備
 
1) 準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%; 雙抗 1%。
 
注意:
 
1. 該細(xì)胞貼壁不是很牢,運(yùn)輸過程中會有部分細(xì)胞飄起或者成團(tuán),屬于正?,F(xiàn)象,收到細(xì)胞后請先放培養(yǎng)箱穩(wěn)定 2-4h 后再拍照留檔,密度大于 80%時(shí)再進(jìn)行處理,處理時(shí),離心上清,將上清中的細(xì)胞一同收集處理即可。
 
2. 培養(yǎng)時(shí)可酌情使用預(yù)鋪0.2%明膠的培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)皿。完全培養(yǎng)液中需添加熱滅活胎牛血清。細(xì)胞生長不能過密,過密細(xì)胞容易脫落,脫落下來的細(xì)胞可以通過離心收集,使用0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA 消化后繼續(xù)培養(yǎng)。
 
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
 
3) 凍存液:90%FBS,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

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