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平臺編號：bio-131309
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細胞信息： NES2Y
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規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
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用途：/
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服務(wù)費用：
加載中…… - 訂購
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注意事項：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準）
人胰島細胞NES2Y
細胞名稱：人胰島細胞NES2Y
產(chǎn)品規(guī)格：T25培養(yǎng)瓶x1；1.5ml凍存管x2
細胞數(shù)量：1x10^6；1x10^6
保存溫度：37℃；-198℃
運輸方式：常溫保溫運輸；干冰運輸
安全等級：1
用途限制：僅供科研2類
培養(yǎng)體系：DMEM高糖培養(yǎng)基+20%FBS+1%三抗
培養(yǎng)溫度：37℃
二氧化碳濃度：5%
簡介：人胰島細胞NES2Y細胞提取于女性供體，為自發(fā)性永生化細胞系。
注釋：Registration:International Depositary Authority,European Collection of Cell Cultures(ECACC);98081006.
Characteristics:Insulin secreting.
Characteristics:Has a loss of function of ATP-regulated potassium channels.
STR信息：/
參考文獻
PubMed=9280302;DOI=10.1016/S0014-5793(97)00874-0
MacFarlane W.M.,Cragg H.,Docherty H.M.,Read M.L.,James R.F.L.,Aynsley-Green A.,Docherty K.
Impaired expression of transcription factor IUF1 in a pancreatic beta-cell line derived from a patient with persistent hyperinsulinaemic hypoglycaemia of infancy(nesidioblastosis).
FEBS Lett.413:304-308(1997)
PubMed=10567373;DOI=10.1074/jbc.274.48.34059
MacFarlane W.M.,Chapman J.C.,Shepherd R.M.,Hashmi M.N.,Kamimura N.,Cosgrove K.E.,O'Brien R.E.,Barnes P.D.,Hart A.W.,Docherty H.M.,Lindley K.J.,Aynsley-Green A.,James R.F.L.,Docherty K.,Dunne M.J.
Engineering a glucose-responsive human insulin-secreting cell line from islets of Langerhans isolated from a patient with persistent hyperinsulinemic hypoglycemia of infancy.
J.Biol.Chem.274:34059-34066(1999)
PubMed=10866047;DOI=10.2337/diabetes.49.6.953
MacFarlane W.M.,O'Brien R.E.,Barnes P.D.,Shepherd R.M.,Cosgrove K.E.,Lindley K.J.,Aynsley-Green A.,James R.F.L.,Docherty K.,Dunne M.J.
Sulfonylurea receptor 1 and Kir6.2 expression in the novel human insulin-secreting cell line NES2Y.
Diabetes 49:953-960(2000)
Patent=US6372501
Aynsley-Green A.,Lindley K.J.,Docherty K.,Dunne M.J.,MacFarlane W.M.,James R.F.L.
Glucose responsive beta-cell line.
Patent number US6372501,16-Apr-2002
PubMed=21099259;DOI=10.4161/isl.1.2.9432
Adams G.G.,Uddin A.,Vives-Pi M.,Pujol-Borrell R.,James R.F.L.
Characterisation of the NES2Y cell line and its use in the production of human glucose-responsive insulin producing(hGRIP)cell lines by cell-cell fusion.
Islets 1:117-123(2009)
驗收細胞注意事項
1、收到人胰島細胞NES2Y細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯(lián)系。
2、收到人胰島細胞NES2Y細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時，請不要打開細胞培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時左右，讓細胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到人胰島細胞NES2Y細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時血清濃度可以加到15％去培養(yǎng)。若細胞迏到80%左右，血清濃度還是在10％。
4、收到人胰島細胞NES2Y細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
5、將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時之需。
6、24小時后，細胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般1-3分鐘，不超過5分鐘?？梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之完全脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經(jīng)驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液，37℃，5%CO2培養(yǎng)。
特別提醒：原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用，請更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。
產(chǎn)品規(guī)格：T25培養(yǎng)瓶x1；1.5ml凍存管x2
細胞數(shù)量：1x10^6；1x10^6
保存溫度：37℃；-198℃
運輸方式：常溫保溫運輸；干冰運輸
安全等級：1
用途限制：僅供科研2類
培養(yǎng)體系：DMEM高糖培養(yǎng)基+20%FBS+1%三抗
培養(yǎng)溫度：37℃
二氧化碳濃度：5%
簡介：人胰島細胞NES2Y細胞提取于女性供體，為自發(fā)性永生化細胞系。
注釋：Registration:International Depositary Authority,European Collection of Cell Cultures(ECACC);98081006.
Characteristics:Insulin secreting.
Characteristics:Has a loss of function of ATP-regulated potassium channels.
STR信息：/
參考文獻
PubMed=9280302;DOI=10.1016/S0014-5793(97)00874-0
MacFarlane W.M.,Cragg H.,Docherty H.M.,Read M.L.,James R.F.L.,Aynsley-Green A.,Docherty K.
Impaired expression of transcription factor IUF1 in a pancreatic beta-cell line derived from a patient with persistent hyperinsulinaemic hypoglycaemia of infancy(nesidioblastosis).
FEBS Lett.413:304-308(1997)
PubMed=10567373;DOI=10.1074/jbc.274.48.34059
MacFarlane W.M.,Chapman J.C.,Shepherd R.M.,Hashmi M.N.,Kamimura N.,Cosgrove K.E.,O'Brien R.E.,Barnes P.D.,Hart A.W.,Docherty H.M.,Lindley K.J.,Aynsley-Green A.,James R.F.L.,Docherty K.,Dunne M.J.
Engineering a glucose-responsive human insulin-secreting cell line from islets of Langerhans isolated from a patient with persistent hyperinsulinemic hypoglycemia of infancy.
J.Biol.Chem.274:34059-34066(1999)
PubMed=10866047;DOI=10.2337/diabetes.49.6.953
MacFarlane W.M.,O'Brien R.E.,Barnes P.D.,Shepherd R.M.,Cosgrove K.E.,Lindley K.J.,Aynsley-Green A.,James R.F.L.,Docherty K.,Dunne M.J.
Sulfonylurea receptor 1 and Kir6.2 expression in the novel human insulin-secreting cell line NES2Y.
Diabetes 49:953-960(2000)
Patent=US6372501
Aynsley-Green A.,Lindley K.J.,Docherty K.,Dunne M.J.,MacFarlane W.M.,James R.F.L.
Glucose responsive beta-cell line.
Patent number US6372501,16-Apr-2002
PubMed=21099259;DOI=10.4161/isl.1.2.9432
Adams G.G.,Uddin A.,Vives-Pi M.,Pujol-Borrell R.,James R.F.L.
Characterisation of the NES2Y cell line and its use in the production of human glucose-responsive insulin producing(hGRIP)cell lines by cell-cell fusion.
Islets 1:117-123(2009)
驗收細胞注意事項
1、收到人胰島細胞NES2Y細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯(lián)系。
2、收到人胰島細胞NES2Y細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時，請不要打開細胞培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時左右，讓細胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到人胰島細胞NES2Y細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時血清濃度可以加到15％去培養(yǎng)。若細胞迏到80%左右，血清濃度還是在10％。
4、收到人胰島細胞NES2Y細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
5、將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時之需。
6、24小時后，細胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般1-3分鐘，不超過5分鐘?？梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之完全脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經(jīng)驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液，37℃，5%CO2培養(yǎng)。
特別提醒：原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用，請更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。
