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平臺(tái)編號(hào)：bio-129469
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細(xì)胞信息： HOK-16B
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規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
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用途：//
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服務(wù)費(fèi)用：
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注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn)）
人口腔角質(zhì)細(xì)胞HOK-16B
| 細(xì)胞名稱(chēng) | 人口腔角質(zhì)細(xì)胞HOK-16B |
| 產(chǎn)品規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1；1.5ml凍存管x2 |
| 細(xì)胞數(shù)量 | 1x10^6 |
| 保存溫度 | 37℃；-198℃ |
| 運(yùn)輸方式 | 常溫保溫運(yùn)輸；干冰運(yùn)輸 |
| 安全等級(jí) | 1 |
| 用途限制 | 僅供科研3類(lèi) |
| 培養(yǎng)體系 | DMEM高糖培養(yǎng)基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%雙抗（Hyclone） |
| 簡(jiǎn)介 | 人口腔角質(zhì)細(xì)胞HOK-16B取自女性供體，貼壁培養(yǎng)。 |
| 注釋 | Transformant:NCBI_TaxID;333760;Human papillomavirus type 16(HPV16). |
| STR信息 | Amelogenin X CSF1PO 10,11 D5S818 9,10 D7S820 12 D13S317 9,12 D16S539 12 TH01 8,9 TPOX 8,11 vWA 17,19 |
| 參考文獻(xiàn) | PubMed=1654226;DOI=10.1093/carcin/12.9.1627 Park N.-H.,Min B.-M.,Li S.-L.,Huang M.Z.,Cherick H.M.,Doniger J. Immortalization of normal human oral keratinocytes with type 16 human papillomavirus. Carcinogenesis 12:1627-1631(1991) PubMed=1330348;DOI=10.1093/carcin/13.11.1981 Li S.-L.,Kim M.S.,Cherrick H.M.,Doniger J.,Park N.-H. Sequential combined tumorigenic effect of HPV-16 and chemical carcinogens. Carcinogenesis 13:1981-1987(1992) PubMed=10675494;DOI=10.3892/ijo.16.3.591 Itakura M.,Mori S.,Park N.-H.,Bonavida B. Both HPV and carcinogen contribute to the development of resistance to apoptosis during oral carcinogenesis. Int.J.Oncol.16:591-597(2000) PubMed=12907203;DOI=10.1016/S1368-8375(03)00049-6 Swan E.A.,Jasser S.A.,Holsinger F.C.,Doan D.,Bucana C.D.,Myers J.N. Acquisition of anoikis resistance is a critical step in the progression of oral tongue cancer. Oral Oncol.39:648-655(2003) PubMed=21868764;DOI=10.1158/1078-0432.CCR-11-0690 Zhao M.,Sano D.,Pickering C.R.,Jasser S.A.,Henderson Y.C.,Clayman G.L.,Sturgis E.M.,Ow T.J.,Lotan R.,Carey T.E.,Sacks P.G.,Grandis J.R.,Sidransky D.,Heldin N.-E.,Myers J.N. Assembly and initial characterization of a panel of 85 genomically validated cell lines from diverse head and neck tumor sites. Clin.Cancer Res.17:7248-7264(2011) |
| 驗(yàn)收細(xì)胞注意事項(xiàng) | 1、收到人口腔角質(zhì)細(xì)胞HOK-16B，請(qǐng)查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請(qǐng)盡快聯(lián)系。 2、收到人口腔角質(zhì)細(xì)胞HOK-16B，如包裝完好，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái)，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)不要打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時(shí)左右，讓細(xì)胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理。 3、收到人口腔角質(zhì)細(xì)胞HOK-16B后，請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞，用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)離心收集細(xì)胞，接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進(jìn)口胎牛血清。剛接到細(xì)胞，若細(xì)胞不多時(shí)血清濃度可以加到15％去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右，血清濃度還是在10％。 4、收到人口腔角質(zhì)細(xì)胞HOK-16B時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過(guò)80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。 5、將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過(guò)的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時(shí)之需。 6、24小時(shí)后，人口腔角質(zhì)細(xì)胞HOK-16B已恢復(fù)并貼滿(mǎn)瓶壁，即可傳代。（貼壁細(xì)胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細(xì)胞生長(zhǎng)面為準(zhǔn)）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn)，一般1-3分鐘，不超過(guò)5分鐘?？梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁，見(jiàn)細(xì)胞脫落下來(lái)，加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之完全脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細(xì)胞量多可一傳三，有些細(xì)胞不易傳得過(guò)稀，有些生長(zhǎng)較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶，以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。（懸浮細(xì)胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。 7、貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無(wú)菌操作。換液時(shí)，換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 特別提醒：原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用，請(qǐng)更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。 |
