跟百歐博偉生物一起探討小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的檢驗(yàn)(ATCC菌種）
中國(guó)微生物菌種查詢網(wǎng) / 2018-09-14 08:59:45
菌種拉丁名：Yersinia enterocolitica subsp.
ATCC菌種名稱：小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌
菌株編號(hào)：ATCC 23715 菌株別名：Billups-1803-68
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌為革蘭氏陰性桿菌或球桿菌，大小為1-3.5×0.5-1.3μm，多單個(gè)散在，有時(shí)排列成短鏈或成堆。對(duì)于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的檢驗(yàn)科分為以下幾步。
一、設(shè)備和材料
除微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外,其他設(shè)備和材料如下:
1 冰箱:0℃~4℃。
2 恒溫培養(yǎng)箱:26℃±1℃、36℃±1℃。
3 顯微鏡:10倍~100倍。
4 均質(zhì)器。
5 天平:感量0.1g。
6 滅菌試管:16mm×160mm、15mm×100mm。
7 滅菌吸管:1mL (具0.01mL刻度)、10mL (具0.1mL刻度)。
8 錐形瓶:200mL、500mL。
9 滅菌平皿:直徑90mm。
10 微生物生化鑒定試劑盒或微生物生化鑒定系統(tǒng)。
二、培養(yǎng)基和試劑
1、尿素培養(yǎng)基
2、改良Y培養(yǎng)基(AgarY,Modified
3、改良磷酸鹽緩沖液
4、CIN-1培養(yǎng)基(CepulodinIrgasanNovobiocinAgar
5、改良克氏雙糖培養(yǎng)基
6、營(yíng)養(yǎng)瓊脂。
7、小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌診斷血清。
8、糖發(fā)酵管
9、鳥氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基
10、半固體瓊脂。
11、緩沖葡萄糖蛋白胨水[甲基紅(MR)和V-P試驗(yàn)用。
三、操作步驟
1、改良克氏雙糖試驗(yàn)
分別挑取5.3中的可疑菌落3個(gè)~5個(gè),分別接種于改良克氏雙糖鐵瓊脂,接種時(shí)先在斜面劃線,再于底層穿刺,26℃±1℃培養(yǎng)24h,將斜面和底部皆變黃且不產(chǎn)氣的培養(yǎng)物做進(jìn)一步的生化鑒定。
2、增菌
以無菌操作取25g(或25mL)樣品放入含有225mL改良磷酸鹽緩沖液增菌液的無菌均質(zhì)杯或均質(zhì)袋內(nèi),以8000r/min均質(zhì)1min或拍擊式均質(zhì)器均質(zhì)1min。液體樣品或粉末狀樣品,應(yīng)振蕩混勻。均質(zhì)后于26℃±1℃增菌48h~72h。增菌時(shí)間長(zhǎng)短可根據(jù)對(duì)樣品污染程度的估計(jì)來確定。
3、分離
將乳與乳制品增菌液或經(jīng)過堿處理的其他食品增菌液分別接種于CIN-1瓊脂平板和改良Y 瓊脂平板,26℃±1℃培養(yǎng)48h±2h。典型菌落在CIN-1上為深紅色中心,周圍具有無色透明圈(紅色牛眼狀菌落),菌落大小為1mm~2mm,在改良Y瓊脂平板上為無色透明、不黏稠的菌落。
四、檢驗(yàn)程序（見下圖）
