一、概述
神經(jīng)干細(xì)胞程序凍存液是神經(jīng)干細(xì)胞的無(wú)血清細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基。該產(chǎn)品僅用于實(shí)驗(yàn)室研究,不能用于臨床和家庭用途或其他用途。
質(zhì)量控制:
經(jīng)過(guò)了細(xì)菌、真菌、支原體檢測(cè);
運(yùn)輸:
采用冰袋保存運(yùn)輸;
保存:
保存于2-8°C,有效期維持三年;
為了維持產(chǎn)品穩(wěn)定性,請(qǐng)勿反復(fù)凍融相關(guān)產(chǎn)品。
二、特點(diǎn)
即用型產(chǎn)品,方便快捷;
復(fù)蘇率更高達(dá) 90%,遠(yuǎn)超普通凍存液的70%的效率;
無(wú)需程序凍存,細(xì)胞可直接置于- 80°C冰箱,省事省時(shí)。
三、凍存步驟
1、選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,按照常用的方法收集細(xì)胞于離心管中,按照培養(yǎng)細(xì) 胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù)(參考數(shù)量:5×10 5 至 5×10 6 cells/mL)。
2、取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考 離心條件:4℃,250 g,離心3-5 min)。
3、吸去上清液。
4、加入適量程序凍存液于離心管中,混合均勻,制成細(xì)胞混合液。
5、將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中。
6、將凍存管直接置于-80℃冰箱中,24 h后移入液氮長(zhǎng)期保存。
四、復(fù)蘇
1、從液氮中取出凍存的細(xì)胞,立即放入37℃水浴鍋中快速解凍。
2、待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,立即逐滴加入少量細(xì)胞完全培養(yǎng)基于該冷凍 管中與細(xì)胞混合,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有8~10 mL該細(xì)胞完全培養(yǎng) 基的試管中,輕輕混合均勻。
3、離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:4℃,250 g,離心3~5 min),吸去上清液。
4、加入1~2 mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。
5、按照合適的接種密度將細(xì)胞接種到細(xì)胞培養(yǎng)容器中,加入適量的已預(yù)熱的新鮮的 細(xì)胞完全培養(yǎng)基。
6、輕輕搖晃培養(yǎng)器皿,使細(xì)胞分布均勻。
7、鏡檢后放置于37℃ ,5% CO2,飽和濕度的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
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