熒光假單胞菌（P.Fluorescens）是一種環(huán)境污染菌。對于人類是一種罕見的機(jī)會致病菌。熒光假單胞菌屬于假單胞菌屬，是化能異養(yǎng)型的革蘭氏陰性菌，呈桿狀，有鞭毛。能分泌黃綠色熒光色素發(fā)出熒光，能產(chǎn)生抗生素、水解酶等代謝產(chǎn)物，在 4℃-37℃范圍內(nèi)，中性環(huán)境中生長，生理生化特性顯著，是作為嗜冷菌是牛奶中危害最大的微生物。
一、培養(yǎng)特征
熒光假單胞菌是典型的革蘭氏陰性菌，電鏡觀察其菌體呈桿狀，對數(shù)生長期時大小一般為（0.7～0.8）μm×（2.3～2.8）μm，呈單個或成對排列，具有極生鞭毛，偶見無鞭毛無動力的菌株，運(yùn)動活潑，不形成芽孢。DNA的G+C比例范圍為59.4～61.3克分子％，生物型IV有最低值，生物型II有最高值。該菌能液化明膠，葡萄糖發(fā)酵、蔗糖發(fā)酵、乳糖發(fā)酵均為陽性，并且能以多種醇類物質(zhì)作為碳源，不能利用乙醇、L－鼠李糖等。甲基紅試驗(yàn)、檸檬酸鹽發(fā)酵、接觸酶反應(yīng)均為陽性，水解淀粉、脂酶反應(yīng)陰性，對青霉素有抗性，不產(chǎn)生綠膿菌素。
具有分解纖維素、蛋白質(zhì)和結(jié)合Fe3+的能力，但不能分解幾丁質(zhì)。有些菌株（生物型II，III和IV）能進(jìn)行反硝化，生物型I和III在卵黃反應(yīng)中為陽性，生物型I一般可分解脂肪，生物型II不解脂。營專性好氧生活，可在pH5.7和7％NaCl的環(huán)境中生長，最適生長溫度約25～30℃。大多數(shù)菌株在4℃或4℃以下生長，在41℃不生長。
熒光假單胞菌在KMB固體培養(yǎng)基上于28℃下培養(yǎng)2d后，生長良好，菌落微隆起，磚紅色，邊緣呈波浪花紋向外擴(kuò)展，表面較濕潤稍凸起不透明，易用接種針挑起，與該菌屬下其他種類的典型區(qū)別在于能產(chǎn)生水溶性的黃綠色素（青膿素），紫外線（366nm）斜光照射下可見黃綠色熒光。熒光假單胞菌在普通培養(yǎng)基、麥康凱、沙門和志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基平板上均可生長。在PDA培養(yǎng)基上長勢極弱或不生長，菌落深紅色。
微生物的良好生長需要培養(yǎng)基各組分濃度和比例合適，碳源和氮源對菌體的生長或蛋白的表達(dá)影響較大，濃度太低會造成營養(yǎng)缺乏，限制菌體正常生長，進(jìn)而影響代謝產(chǎn)物的產(chǎn)量。國內(nèi)外一些學(xué)者對熒光假單胞菌的最佳生長條件做了研究，對一些促生菌和生防菌的最適培養(yǎng)條件進(jìn)行了測定和分析，為菌株的最佳發(fā)酵條件和生態(tài)適應(yīng)性評價提供了依據(jù)。
二、風(fēng)險提示
熒光假單胞菌除了可以防治植物的病害之外，本身還是一種環(huán)境污染菌。在日常生活中，熒光假單胞菌是奶類、蛋類在低溫保存條件下導(dǎo)致腐敗變質(zhì)的主要細(xì)菌之一。熒光假單胞菌對于人類是一種罕見的機(jī)會致病菌。在臨床上最多見的是血液及血制品被熒光假單胞菌污染，當(dāng)病人輸入了被熒光假單胞菌污染的血液及血制品后，可出現(xiàn)敗血癥、感染性休克和血管內(nèi)凝血等嚴(yán)重后果。
由于現(xiàn)有的許多抗生素對熒光假單胞菌都不敏感，所以一旦感染此菌，病死率很高。熒光假單胞菌還可以使一些動物體發(fā)生病變，產(chǎn)生相應(yīng)的癥狀。在植物體中，熒光假單胞菌可以協(xié)同一些病蟲害加重對植物體的危害，如研究發(fā)現(xiàn)，松材線蟲在結(jié)合有毒的熒光假單胞菌時，能夠促進(jìn)黑松的致病率。熒光假單胞菌對動植物的危害受到外部環(huán)境的影響，越有利于熒光假單胞菌生長的環(huán)境就對動植物的危害越大。
隨著接種冰核細(xì)菌的濃度增加，煙株的凍害程度逐漸加劇。假單胞菌屬中除了熒光假單胞菌之外，其他的假單胞菌也能造成環(huán)境的污染。研究發(fā)現(xiàn)寧波沿海陸源排污口中存在較多的假單胞菌屬，假單胞菌屬的含量與排污口的主要污染物有關(guān)，氨氮含量較高的排污口假單胞菌屬的含量更高。還推測與季節(jié)性溫度變化有關(guān)。
三、生物學(xué)作用
以原核生物16S保守序列設(shè)計(jì)引物，用PCR方法，從熒光假單胞菌基因組中擴(kuò)取其16S保守序列，連接到T-載體，以設(shè)計(jì)好的限制性內(nèi)切酶，分別切割表達(dá)載體（pET32a、pMAL-c2、pGEX-6p-1 ）和目的基因，然后將目的基因與表達(dá)載體連接，轉(zhuǎn)化大腸桿菌表達(dá)宿主菌（BL21、Origami），并以酶切方法驗(yàn)證連接的正確性；誘導(dǎo)表達(dá)后即可得到LPL（脂蛋白脂肪酶）
熒光假單胞菌 (Pseudomonas fluorescens)
分類學(xué)上屬于細(xì)菌域、變形菌門、γ-變形菌綱、假單胞菌目、假單胞菌科的假單胞菌屬。細(xì)胞為直的桿菌，大小為0.7-0.8X2.3-2.8 微米，不產(chǎn)芽孢，革蘭氏染色陰性。有數(shù)根極生鞭毛，運(yùn)動。需氧,進(jìn)行嚴(yán)格的呼吸型代謝,以氧為最終電子受體。能以硝酸鹽為替代的電子受體進(jìn)行厭氧呼吸。化能營養(yǎng)異養(yǎng)，不需要有機(jī)生長因子。氧化酶陽性，接觸酶陽性。能利用葡萄糖和果糖，有些菌株能從蔗糖合成果聚糖，明膠液化。生長溫度范圍 4-37℃，最適生長溫度是25-30℃。 DNA中G+C 含量是60-61%。廣泛分布于自然界，如土壤、水、植物及動物活動環(huán)境中。該菌生化能力活躍，可降解許多人工合成化合物，常被用于環(huán)境保護(hù)。
還是一種重要的植物根際促生細(xì)菌,是已知植物根際有益微生物中種群數(shù)量較多的細(xì)菌種類之一。該菌營養(yǎng)需要相對簡單,能夠利用根系分泌物中大部分營養(yǎng)迅速在植物根圍定殖。其中一些菌株具有促進(jìn)植物生長和防治病害的作用,因而可能用于植物病害的生物防治。
四、臨床意義
可從傷口、痰、胸水、尿和血液中分離出來，也可從血庫存在中分離出?？稍诒鋬Υ娴难杭把褐破分蟹敝?，而且自溶后釋放內(nèi)毒素。其內(nèi)毒素的磷脂部分，可導(dǎo)致輸血后不可逆的休克。
五、相關(guān)污染事例
【北京工商局稱“發(fā)光豬肉”為細(xì)菌引起】北京市工商局13日回應(yīng)稱，北京市食品安全監(jiān)控中心對送檢“發(fā)光豬肉”樣本進(jìn)行了檢測，送檢樣本均未檢出熒光增白物質(zhì)，但檢出了熒光假單胞菌。專家表示，這種細(xì)菌并不可怕，對正常人群不具有致病性，只要豬肉本身沒有腐敗變質(zhì)，煮熟即可殺滅該細(xì)菌。
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