一、概述
轉(zhuǎn)基因食品又稱遺傳修飾食品（genetically modified food），簡稱GMF或GM食品。轉(zhuǎn)基因食品大體上分為如下三類。
1、轉(zhuǎn)基因植物食品
由轉(zhuǎn)基因植物如轉(zhuǎn)基因的玉米、大豆、水稻、馬鈴薯、番茄、香蕉、蘋果、菠菜等生產(chǎn)加工而成。
2、轉(zhuǎn)基因動物食品
如轉(zhuǎn)基因的魚、雞、牛、羊等。目的主要通過導(dǎo)入外源基因或?qū)ψ陨砘蚣右孕揎梺硎故荏w動物降低結(jié)締組織交聯(lián)度、改善肉質(zhì)．或使受體生物個體肥大，或生產(chǎn)營養(yǎng)價值高的蛋、肉、乳等。
3、轉(zhuǎn)基因微生物食品
如轉(zhuǎn)基因微生物發(fā)酵而制得的葡萄酒、啤酒、醬油等，此類食品是利用轉(zhuǎn)基因微生物（如轉(zhuǎn)基因酵母和酶）的作用而生產(chǎn)出來的食品。后兩類轉(zhuǎn)基因食品目前在市場上還很少。
二、ELISA技術(shù)與轉(zhuǎn)基因食品檢測
1、ELISA基本原理
建立在抗體抗原免疫學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上。
ELISA分析法必須具備待檢測的固定相抗原或抗體、酶標(biāo)記的抗原或抗體、酶作用的底物三種試劑，且滿足兩個前提條件：
待檢測的抗原或抗體能夠結(jié)合到不溶性載體表面并保持活性；
標(biāo)記酶能與抗原或抗體結(jié)合并同樣 保持各自生物活性。
ELISA分析基本步驟如下：①將抗原（Ag）或抗體Ab結(jié)合到固相載體平板的孔里；②待測溶液的特殊抗原或抗體結(jié)合到敏化載體表面；③加入酶標(biāo)抗體使之與抗原或抗體化合物相結(jié)合；④結(jié)合物通過標(biāo)記酶催化底物的顏色改變而被檢測；⑤通過最后溶液的顏色深淺對待側(cè)抗原或抗體進(jìn)行定量分析。
2、ELISA分析法的靈敏度
3、ELISA分析法的要點
特異性高，獲得結(jié)果快，儀器簡單，易于操作，對人員要求不高。免卻了對樣品進(jìn)行核酸提取的麻煩，同時可降低檢測的成本，由于酶既有很高的催化效率，可極大的放大反應(yīng)效果，從而使測定達(dá)到很高的靈敏度和穩(wěn)定性。
三、PCR技術(shù)與轉(zhuǎn)基因食品的檢測
1、PCR技術(shù)對轉(zhuǎn)基因食品的定性檢測
（1）PCR基本原理 PCR技術(shù)由美國Centus公司Kary Mullis發(fā)明，20世紀(jì)90年代逐漸成熟應(yīng)用。簡單地說PcR就是利用核酸DNA聚合酶、引物和4種脫氧單核苷酸在試管內(nèi)完成模板DNA的快速復(fù)制．
（2）PCR技術(shù)檢測轉(zhuǎn)基因食品的技術(shù)關(guān)鍵和理論依據(jù)
（3）PCR檢測轉(zhuǎn)基因食品的基本步驟
①待檢材料DNA提?。和ǔ＠肅TAB法從食品材料中提取核酸；
②PCR反應(yīng)：設(shè)計合適引物。PCR擴增待檢樣品中的靶標(biāo)DNA；
③觀測PCR產(chǎn)物：通過凝膠電泳分析將PCR產(chǎn)物展現(xiàn)；
④確定結(jié)果：有時為了避免假阻性，還需要對PCR產(chǎn)物進(jìn)行限制性酶切分析進(jìn)行質(zhì)量控制。
2、PCR技術(shù)對轉(zhuǎn)基因食品的定量檢測
目前基于GMO特異DNA片段的定性PCR篩選方法已廣泛應(yīng)用于GMO食品檢測．但是隨著各國有關(guān)GMO標(biāo)簽法的建立和不斷完善，對食品中的GMO含量的下限已有所規(guī)定。為此，研究者在定性篩選PCR方法的基礎(chǔ)上發(fā)展了不同的定量GMO的PCR檢測方法。目前，國外較為成熟的方法主要有半定量PCR法、定量競爭PCR(Quantitative competitive PCR)和Real—time PCR(實時定量PCR)法等三種。
（1）半定量PCR法
①樣品DNA的提取和定量。
按常規(guī)方法提取DNA后，取部分樣品DNA在0.8％瓊脂糖凝膠中電泳，與已知古量的Marker比較，用計算機凝腔成像分析系統(tǒng)處理結(jié)果，以確定所提取的DNA量。例如，一般700mg的玉米粉可提取lμg DNA。
②PCR反應(yīng)。
a.樣品DNA的質(zhì)量分析
b.建立內(nèi)部參照反應(yīng)體系
c.測定CaMV35S啟動子的定量PCR反應(yīng)
（2）定量競爭PCR法 PCR反應(yīng)實質(zhì)是對特定模板DNA的指數(shù)擴增放大，而在相同的條件下，獲得DNA的量與最初模板DNA的濃度成正相關(guān)，競爭定量PCR就是依據(jù)這種擴增DNA與模板DNA之間的濃度相關(guān)性設(shè)計的?；驹硎窍葮?gòu)建含有修飾過的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)DNA片段(競爭DNA)，競爭DNA由質(zhì)粒組成，帶有一個改造PCR擴增子，改造部分可以是DNA插人序列、缺失序列或者點突變，競爭DNA與待測目標(biāo)DNA在同一反應(yīng)管中進(jìn)行PCR共擴增，因競爭DNA片段和待測DNA的大小不同，經(jīng)瓊脂糖凝膠可將兩者分開，通過比較兩種條帶的量可進(jìn)行定量分析。
四、生物芯片與轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測
就目前轉(zhuǎn)基因食品檢測中常用的ELISA和PCR技術(shù)而言，最大的缺點是檢測范圍窄，效率低，無法高通量大規(guī)模地同時檢測多種樣品，尤其是對轉(zhuǎn)基因背景一無所知的情況下。對各種候選待檢基因序列或蛋白的逐一篩查幾乎是不可能的。而目前正在研究的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品所涉及的基因數(shù)量有上萬種，今后都有可能進(jìn)入商品化生產(chǎn)，顯而易見對進(jìn)出口產(chǎn)品的檢測，需要有更有效的、快速、特別是高通量的檢測方法，最近幾年出現(xiàn)的生物芯片技術(shù)能較好地解決這一問題。生物芯片根據(jù)所載探針種類分為基因芯片和蛋白質(zhì)芯片兩大類：基因芯片以DNA為探針。依據(jù)核酸雜交的原理檢測樣品中的特定基因序列；蛋白質(zhì)芯片以蛋白質(zhì)為探針，依據(jù)抗原抗體反應(yīng)的免疫學(xué)原理檢測樣品中的特定蛋白質(zhì)。
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