常見(jiàn)細(xì)菌特征的鑒定方法！
小楊 / 2020-06-17 08:29:40
一、菌落形態(tài)
1、平板制作將15～20 ml融化的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基冷卻至50℃左右，按無(wú)菌操作倒人直徑9 cm的培養(yǎng)皿內(nèi)。如有冷凝水，倒置于30～37℃溫箱內(nèi)，使之干燥以便于單菌落的出現(xiàn)。
2、單菌落平板（劃線法）一點(diǎn)菌苔或一環(huán)細(xì)菌懸液，在上述無(wú)冷凝水的平板一側(cè)邊緣處，反復(fù)涂抹在直徑約為1 cm大小的面積上；燒灼接種環(huán)，冷卻后，從上述涂菌處劃出7～8條直線，前3～4條線的從涂菌處劃出，后3～4條直線可不通過(guò)涂菌處，劃線時(shí)接種環(huán)與平板表面成30°～40°角，輕輕接觸，不要使接種環(huán)劃破表面；如上述燒灼、劃線操作再重復(fù)數(shù)次，以劃滿整個(gè)平板為宜；倒置平板，于最適溫度培養(yǎng)1～2天，出現(xiàn)單菌落。
3、菌落形態(tài)觀察 形狀和大小、邊緣、表面、隆起形狀，透明度、菌落及培養(yǎng)基的顏色等。
二、生長(zhǎng)溫度和耐熱性
最高、最適、最低和耐受溫度能力的特征常常是某些細(xì)菌鑒定的特征之一，常用的測(cè)定溫度(℃)有4,20,30,37,41,45和65。
以液體培養(yǎng)物(24h培養(yǎng)物）一小環(huán)轉(zhuǎn)入澄清營(yíng)養(yǎng)肉汁或合適的液體培養(yǎng)基，置不同溫度培養(yǎng)。37℃以上的測(cè)定應(yīng)置水浴中，需3次移種生長(zhǎng)者才能確認(rèn)。
耐熱性意味著細(xì)胞經(jīng)受高溫還能存活，主要用于鏈球菌的鑒定。在1m1合適的肉湯或脫脂牛奶中接種1滴24小時(shí)的培養(yǎng)物，于60℃水浴30 min,然后于35～37℃培養(yǎng)48 h,生長(zhǎng)者則表明存活，糞腸球菌(Enterococcous f aecalis)為該測(cè)定的陽(yáng)性對(duì)照。
三、氧和二氧化碳的需要
氧和二氧化碳的需要，常以對(duì)氧要求的不同程度來(lái)區(qū)別細(xì)菌，例如好氧菌、微好氧菌和厭氧菌以及兼性厭氧。測(cè)定方法有兩種：
1、需氧性測(cè)定將接種的培養(yǎng)物培養(yǎng)于不同條件包括空氣、含5% CO2和10% O2厭氧罐中，分別測(cè)得需氧性。
2、芽孢菌厭氧性測(cè)定
（1）厭氧培養(yǎng)基
（2）接種與觀察：用一小環(huán)（外徑1.5mm的接種環(huán)）營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物穿刺于上述培養(yǎng)基，培養(yǎng)于30℃，3天和7天分別記載，僅在表面生長(zhǎng)者為好氧菌，如沿穿刺線牛長(zhǎng)或下部生長(zhǎng)者為兼性厭氧菌或厭氧菌。
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