一、背景
大鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞提取物是從大鼠原代子宮內(nèi)膜上皮細胞提取的,大鼠原代子宮內(nèi)膜上皮細胞從正常大鼠子宮組織制備可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。
二、生理結(jié)構(gòu)及功能
子宮內(nèi)膜上皮細胞是指構(gòu)成哺乳類子宮內(nèi)壁的一層,子宮內(nèi)膜上皮細胞主要功能:(1)子宮內(nèi)膜亦稱子宮粘膜,是指構(gòu)成哺乳類子宮內(nèi)壁的一層。(2)子宮內(nèi)膜對動情素和孕激素都起反應(yīng),因此可隨著性周期(發(fā)情周期、月經(jīng)周期)發(fā)生顯著的變化。子宮內(nèi)膜層(endometrium,uterine endome-trium)是指構(gòu)成哺乳類子宮內(nèi)壁的一層,對雌激素和孕激素都起反應(yīng),因此可隨著性周期(發(fā)情周期、月經(jīng)周期)發(fā)生顯著的變化。
子宮內(nèi)膜分為功能層和基底層2層。內(nèi)膜表面2/3為致密層和海綿層統(tǒng)稱功能層,受卵巢性激素影響發(fā)生周期變化而脫落?;讓訛榭拷訉m肌層的1/3內(nèi)膜,不受卵巢性激素影響,不發(fā)生周期性的變化。雌激素可引起子宮肥大,孕激素可促使子宮內(nèi)膜發(fā)生特殊的妊娠初期變化,或改變子宮內(nèi)膜的性質(zhì),使之具有產(chǎn)生蛻膜的能力。 子宮內(nèi)膜覆蓋著粘膜,由粘膜上皮與其下方的固有層所組成。粘膜上皮為柱狀上皮、立方上皮或復(fù)層柱狀上皮,雌激素分泌時,各上皮細胞將長大、分裂使數(shù)目增多。固有層中粘膜上皮下方的部分稱為機能層,上皮細胞進入其中形成子宮腺,并對雌激素起反應(yīng)。機能層的下層稱為基底層,富有血管。
三、應(yīng)用
大鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞提取物可用于粒細胞集落刺激因子對大鼠薄型子宮內(nèi)膜治療的初步研究
粒細胞集落刺激因子(G-CSF)對大鼠薄型子宮內(nèi)膜的治療作用及其可能的機制。方法取性成熟未交配雌性具有規(guī)律動情周期的SD大鼠36只,采用宮腔內(nèi)保留灌注無水乙醇5分鐘建立薄型子宮內(nèi)膜大鼠模型,隨機分為4組:
①急性損傷治療組:于模型制備后立即皮下注射生理鹽水(NS)稀釋的G-CSF(40μg/kg/d),連續(xù)5d;
②急性損傷對照組:于模型制備后立即皮下注射等量NS,連續(xù)5d;
③慢性損傷治療組:于模型制備3個動情周期后皮下注射NS稀釋的G-CSF(40μg/kg/d),連續(xù)5d;
④慢性損傷對照組:于模型制備3個動情周期后皮下注射等量NS,連續(xù)5d。均于注射G-CSF或NS后的第4個動情期處死大鼠,取雙側(cè)子宮組織行蘇木精-伊紅(HE)染色觀察子宮內(nèi)膜形態(tài)學(xué)改變(測量子宮內(nèi)膜厚度),免疫組織化學(xué)方法檢測子宮內(nèi)膜單位面積中細胞角蛋白和波形蛋白的表達。
結(jié)果1.急、慢性損傷對照組子宮內(nèi)膜形態(tài)學(xué)均表現(xiàn)為薄型子宮內(nèi)膜。與此相比,急性損傷治療組子宮內(nèi)膜明顯增厚,表面呈波浪形,腺上皮及腔上皮細胞完整,呈立方狀,腺體數(shù)目稀少,部分管腔囊性擴張,間質(zhì)疏松,新生毛細血管數(shù)目明顯增多;慢性損傷治療組子宮內(nèi)膜厚度增加,但不及急性損傷治療組,表面略可見波浪形,腺體數(shù)目無變化,間質(zhì)疏松,新生血管數(shù)目增多。
波形蛋白主要表達于間質(zhì)細胞和少量內(nèi)皮細胞中,以此反映間質(zhì)細胞再生長情況。四組單位內(nèi)膜面積中波形蛋白面積依次為:13.40±0.63%、7.27±0.48%、12.86±0.71%、7.30±0.53%,各治療組與相應(yīng)對照組間比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),兩治療組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),兩對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
結(jié)論1.宮腔內(nèi)保留灌注無水乙醇5分鐘經(jīng)過約7個動情周期(約28-35天),子宮內(nèi)膜仍表現(xiàn)為薄型,進一步證實薄型子宮內(nèi)膜大鼠模型的可重復(fù)性和穩(wěn)定性。2.G-CSF對子宮內(nèi)膜的急性損傷和慢性損傷均具有一定的治療作用,但對急性損傷的治療效果佳,可能與間質(zhì)細胞增生和血管新生有關(guān)。
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