無菌室滅菌操作的準備工作及滅菌方法的選擇與執(zhí)行注意事項！
小楊 / 2025-06-27 10:13:31
百歐博偉生物：無菌室的滅菌是維持其潔凈度和防止污染的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。以下是需要特別注意的關(guān)鍵事項：
一、滅菌前的準備工作
1、徹底清潔：
先清潔后滅菌：這是最基本原則。任何灰塵、污垢、有機物殘留都會大大降低滅菌劑的效果，形成保護層阻礙滅菌劑接觸微生物。
清潔范圍：包括所有表面（墻面、地面、天花板、工作臺面）、設(shè)備外表面、椅子、門把手、傳遞窗、空調(diào)出風(fēng)口格柵等。特別注意角落、縫隙和難以觸及的地方。
清潔工具：使用專用的、不易掉纖維的無塵抹布、拖把和清潔桶。清潔工具本身必須保持潔凈，最好在無菌室專用或經(jīng)過嚴格消毒。
清潔劑：使用合適的清潔劑（如無殘留的表面活性劑溶液），徹底清除油污、指紋等有機污染物。清潔后需用無菌水或無塵布擦拭干凈，去除清潔劑殘留。
2、移除不必要的物品：
將非必需的設(shè)備、耗材、記錄本、個人物品等移出無菌室或放入密閉的柜子內(nèi)。只保留本次操作或滅菌后立即使用的必要物品。
3、設(shè)備準備：
確保所有需要使用的滅菌設(shè)備（如甲醛發(fā)生器、臭氧發(fā)生器、VHP發(fā)生器、噴霧器、紫外燈）狀態(tài)良好，經(jīng)過校準，并在有效期內(nèi)。
檢查并更換高效空氣過濾器的預(yù)過濾器（如果可更換）。
確?？照{(diào)凈化系統(tǒng)正常運行。
4、人員準備：
操作人員需經(jīng)過嚴格培訓(xùn)，熟悉滅菌流程、設(shè)備操作和安全防護措施。
穿戴適當?shù)膫€人防護裝備（如防護服、口罩、手套、護目鏡或面罩，特別是使用化學(xué)熏蒸劑時）。
二、滅菌方法的選擇與執(zhí)行注意事項
1、化學(xué)熏蒸法（甲醛、過氧化氫蒸汽VHP、臭氧等）：
密封性檢查：滅菌前必須嚴格檢查無菌室的密封性（門縫、傳遞窗、管線穿孔等），確保氣體不會泄漏。必要時使用密封膠帶。
濕度控制：某些方法對濕度有要求，需提前調(diào)節(jié)室內(nèi)濕度至適宜范圍。
濃度與時間：嚴格按照操作規(guī)程，確保滅菌劑達到并維持足夠的濃度和作用時間。使用經(jīng)過校準的濃度監(jiān)測設(shè)備。
均勻分布：確保氣體/蒸汽能在整個空間內(nèi)均勻分布，避免死角?？赡苄枰褂蔑L(fēng)扇輔助循環(huán)（注意風(fēng)扇本身不能成為污染源）。
安全第一：這是最危險的環(huán)節(jié)！操作人員必須佩戴合適的呼吸防護裝備，設(shè)置警戒標識，防止他人誤入。確保有良好的通風(fēng)排毒系統(tǒng)。
中和與排放：滅菌結(jié)束后，必須按照安全規(guī)程進行徹底的中和和強制排風(fēng)，將殘留氣體濃度降至安全限值以下（通常需要在線監(jiān)測或使用檢測管確認）。未經(jīng)驗證安全，絕對禁止人員進入！
2、液體消毒劑擦拭法：
消毒劑選擇：選擇廣譜、高效、低腐蝕性、低殘留且與無菌室材料兼容的消毒劑（如稀釋的過氧化氫、季銨鹽類、酚類等）。注意輪換使用不同類型的消毒劑以防止微生物產(chǎn)生耐藥性。
濃度有效性：確保使用正確濃度的消毒液，并注意其有效期。現(xiàn)用現(xiàn)配效果更佳。
擦拭技巧：采用“S”形或重疊擦拭法，避免遺漏區(qū)域。保持擦拭巾濕潤，但不要滴液。遵循“從潔凈區(qū)到較臟區(qū)”，“從上到下”的原則。
接觸時間：消毒劑必須與被消毒表面保持足夠的濕潤接觸時間（通常幾分鐘，具體看產(chǎn)品說明），才能有效殺滅微生物。不可剛擦上就馬上擦干。
擦拭巾管理：使用無菌、不脫落纖維的無塵布。一塊布擦一個區(qū)域或一面，及時更換，避免交叉污染。不要將用過的布放回消毒液容器中。
3、紫外線照射法：
局限性認知：紫外線（UV-C）只能作為輔助滅菌手段，不能單獨用于空間滅菌。它穿透力弱，存在照射陰影區(qū)（如物體背面、下層），且對芽孢殺滅效果有限。
表面清潔：照射前表面必須清潔干凈，灰塵和污垢會阻擋紫外線。
照射距離與時間：確保足夠的照射強度和照射時間（通常需要數(shù)小時）。燈管與被照射表面的距離不宜過遠（通常1-1.5米內(nèi)有效）。
燈管維護：定期清潔燈管表面灰塵（影響強度），并監(jiān)測燈管強度（使用UV強度計），及時更換老化燈管（通常壽命1000-3000小時）。
人員安全：紫外線對人眼和皮膚有害。必須在人員撤離后開啟，并在人員進入前關(guān)閉。
三、滅菌后的維持與管理
1、驗證滅菌效果：
生物指示劑：這是驗證空間滅菌效果的金標準。在滅菌前將含有高抗性微生物（如
嗜熱脂肪地芽孢桿菌芽孢或
枯草芽孢桿菌黑色變種芽孢）的生物指示劑放置在滅菌艙室內(nèi)的不同位置（特別是最難滅菌的位置和角落）。滅菌后取出培養(yǎng)，確認無菌生長。
化學(xué)指示劑：可輔助判斷滅菌過程是否達到某些物理條件（如溫度、濕度、氣體濃度），但不能直接證明微生物被殺滅。
環(huán)境監(jiān)測：滅菌后，按照計劃進行沉降菌、浮游菌、表面微生物等的監(jiān)測，確認環(huán)境達到所需潔凈度級別。
2、防止再污染：
人員進出控制：嚴格執(zhí)行人員進出程序（更衣、風(fēng)淋、消毒）。
物料進出控制：所有進入無菌室的物料必須經(jīng)過嚴格的清潔和滅菌（如通過傳遞窗的消毒、擦拭或VHP滅菌），并記錄。
行為規(guī)范：室內(nèi)人員動作應(yīng)輕緩、減少不必要的活動和交談，避免產(chǎn)生大量微粒和氣溶膠。
設(shè)備維護：定期維護空調(diào)凈化系統(tǒng)（包括高效過濾器的完整性測試和更換）、滅菌設(shè)備等。
持續(xù)清潔消毒：每次操作前后對工作區(qū)域進行局部清潔消毒。定期進行全面的清潔和空間滅菌（頻率根據(jù)使用情況和監(jiān)測結(jié)果確定）。
四、記錄與文件
詳細記錄：每一次滅菌操作都必須詳細記錄，包括：
滅菌日期、時間、操作人員
使用的滅菌方法、設(shè)備編號
關(guān)鍵參數(shù)（如氣體濃度、溫度、濕度、作用時間、消毒劑名稱/濃度/批號）
生物指示劑/化學(xué)指示劑的放置位置、品牌、批號、結(jié)果
滅菌效果驗證結(jié)果（生物指示劑培養(yǎng)結(jié)果）
排毒結(jié)束時間和確認安全的記錄
任何異常情況及處理措施
文件保存：這些記錄是質(zhì)量體系的重要組成部分，必須妥善保存，便于追溯和審計。
總結(jié)關(guān)鍵點：
清潔是滅菌的前提和基礎(chǔ)。
選擇合適的滅菌方法并嚴格遵守操作規(guī)程。
化學(xué)熏蒸安全第一！密封、防護、中和、排毒、驗證缺一不可。
擦拭消毒要保證濃度、接觸時間和覆蓋全面。
紫外線僅作輔助，不能替代。
滅菌效果必須通過生物指示劑驗證。
滅菌后維持無菌狀態(tài)依賴于嚴格的日常管理和人員規(guī)范。
完整準確的記錄至關(guān)重要。
嚴格遵循這些注意事項，才能確保無菌室滅菌的有效性和可靠性，為關(guān)鍵的無菌操作提供保障。
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