微生物檢驗(yàn)常用生化反應(yīng)的原理與實(shí)驗(yàn)方法及應(yīng)用與結(jié)果！
小楊 / 2025-05-07 10:20:35
百歐博偉生物：在微生物檢驗(yàn)中，生化反應(yīng)是鑒定細(xì)菌或其他微生物的重要方法，通過(guò)檢測(cè)微生物對(duì)不同底物的代謝能力（如產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、酶活性等）來(lái)區(qū)分其種類(lèi)。以下是常用的生化反應(yīng)及其原理和應(yīng)用：
一、糖（醇）發(fā)酵試驗(yàn)
1、原理：檢測(cè)微生物是否發(fā)酵特定糖（如葡萄糖、乳糖）或醇類(lèi)產(chǎn)酸或產(chǎn)氣。
2、方法：將菌種接種至含糖培養(yǎng)基（如酚紅肉湯），加入杜氏管觀察產(chǎn)氣。
3、應(yīng)用：
產(chǎn)酸：指示劑（酚紅）變黃色。
產(chǎn)氣：杜氏管內(nèi)有氣泡。
二、IMViC試驗(yàn)（用于腸桿菌科鑒定）
1、吲哚試驗(yàn)（Indole test）：
檢測(cè)細(xì)菌能否分解色氨酸生成吲哚。
試劑：柯氏試劑（對(duì)二甲氨基苯甲醛）。
結(jié)果：液面顯紅色為陽(yáng)性（如大腸桿菌陽(yáng)性，產(chǎn)氣腸桿菌陰性）。
2、甲基紅試驗(yàn)（Methyl red test）：
檢測(cè)產(chǎn)酸能力（pH ≤4.5）。
試劑：甲基紅指示劑。
結(jié)果：紅色為陽(yáng)性（如大腸桿菌陽(yáng)性，產(chǎn)氣腸桿菌陰性）。
3、V-P試驗(yàn)（Voges-Proskauer test）：
檢測(cè)細(xì)菌生成乙酰甲基甲醇的能力。
試劑：α-萘酚和KOH。
結(jié)果：紅色為陽(yáng)性（如產(chǎn)氣腸桿菌陽(yáng)性，大腸桿菌陰性）。
4、枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)（Citrate utilization）：
檢測(cè)能否利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源。
培養(yǎng)基：西蒙氏枸櫞酸鹽培養(yǎng)基。
結(jié)果：變藍(lán)色為陽(yáng)性（如產(chǎn)氣腸桿菌陽(yáng)性，大腸桿菌陰性）。
三、氧化酶試驗(yàn)
原理：檢測(cè)細(xì)胞色素氧化酶（參與電子傳遞鏈）。
試劑：四甲基對(duì)苯二胺（氧化酶試紙或試劑）。
結(jié)果：30秒內(nèi)顯紫色為陽(yáng)性（如
銅綠假單胞菌陽(yáng)性，腸桿菌科陰性）。
四、過(guò)氧化氫酶試驗(yàn)（觸酶試驗(yàn)）
原理：檢測(cè)是否產(chǎn)生過(guò)氧化氫酶（分解H?O?為水和氧氣）。
方法：滴加3% H?O?于菌落上。
結(jié)果：產(chǎn)生氣泡為陽(yáng)性（如葡萄球菌陽(yáng)性，鏈球菌陰性）。
五、凝固酶試驗(yàn)
原理：檢測(cè)
金黃色葡萄球菌是否產(chǎn)生凝固酶（使血漿凝固）。
方法：菌落與兔血漿混合，37℃孵育。
六、尿素酶試驗(yàn)
原理：檢測(cè)細(xì)菌能否分解尿素產(chǎn)氨。
培養(yǎng)基：尿素瓊脂（含酚紅指示劑）。
結(jié)果：變紅色為陽(yáng)性（如變形桿菌陽(yáng)性，大腸桿菌陰性）。
七、硫化氫（H?S）試驗(yàn)
原理：檢測(cè)細(xì)菌分解含硫氨基酸（如胱氨酸）產(chǎn)生H?S。
培養(yǎng)基：含鐵離子的培養(yǎng)基（如TSI斜面、SIM培養(yǎng)基）。
八、明膠液化試驗(yàn)
原理：檢測(cè)細(xì)菌分泌明膠酶的能力。
方法：穿刺接種明膠培養(yǎng)基，4℃冷藏后觀察是否液化。
結(jié)果：明膠液化（呈液態(tài)）為陽(yáng)性（如
銅綠假單胞菌陽(yáng)性）。
九、硝酸鹽還原試驗(yàn)
原理：檢測(cè)細(xì)菌能否將硝酸鹽（NO??）還原為亞硝酸鹽（NO??）或氮?dú)狻?/div>
試劑：硝酸鹽試劑（對(duì)氨基苯磺酸和α-萘胺）。
結(jié)果：紅色為陽(yáng)性（如大腸桿菌陽(yáng)性）。
十、其他常用試驗(yàn)
苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)：用于區(qū)分變形桿菌（陽(yáng)性）與大腸桿菌（陰性）。
七葉苷水解試驗(yàn)：用于鑒定腸球菌和鏈球菌。
溶血試驗(yàn)：觀察血瓊脂平板上的溶血類(lèi)型（α、β、γ溶血）。
十一、自動(dòng)化生化鑒定系統(tǒng)
現(xiàn)代微生物實(shí)驗(yàn)室常用自動(dòng)化系統(tǒng)快速鑒定微生物，通過(guò)多指標(biāo)生化反應(yīng)數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)完成鑒定。
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