大腸桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基的配方及原理
中國(guó)微生物菌種查詢網(wǎng) / 2017-03-16 13:46:53
1月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LST)
原理：
月桂基硫酸鈉，別名月桂醇硫酸鈉，表面活性作用強(qiáng)，具有乳化作用。
一種優(yōu)質(zhì)蛋白胨，是以新鮮牛肉和牛骨經(jīng)胰酶消化，濃縮干燥而成的淺黃色粉末。具有色淺、易溶、透明、無(wú)沉淀等良好的物理性狀。含有豐富的氮源、氨基酸等胰蛋白胨或胰酪胨20g提供碳源和氮源滿足細(xì)菌生長(zhǎng)的需求。
配方：（g/L）
原理：
膽鹽（BileSalt）：是一種膽酸的鈉鹽，是膽酸的羧基和甘氨酸或牛磺酸(C2H7NO3S)的氨基(C2H5NO2)，通過(guò)酰胺鍵結(jié)合而成。
①可降低培養(yǎng)基與細(xì)菌細(xì)胞膜界面上的表面張力，使細(xì)胞膜紊亂，導(dǎo)致細(xì)菌自溶。
②腸桿菌科細(xì)菌在腸道內(nèi)長(zhǎng)期與膽汁接觸。對(duì)膽鹽有一定的抵抗力。合適的膽鹽量能促進(jìn)該科細(xì)菌的生長(zhǎng)。
?、勰扄}遇酸生成沉淀，使菌落色素不致擴(kuò)散從而有利于鑒別。
?、苣扄}中含有一定量的膽紅素、粘蛋白、色氨酸，對(duì)不受膽鹽抑制的細(xì)菌生長(zhǎng)有營(yíng)養(yǎng)作用。
煌綠（亮綠）：抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和大多數(shù)非沙門氏菌的革蘭氏陰性桿菌，通常抑制發(fā)酵乳糖、蔗糖的細(xì)菌?；途G和枸櫞酸鈉對(duì)大腸菌的生長(zhǎng)、菌體蛋白質(zhì)的合成和糖的利用都有顯著的抑制作用,以煌綠的作用為較強(qiáng)。枸酸鈉能抑制大腸菌的呼吸,而煌綠的抑制作用則較弱?；旌夏扄}及硫代硫酸鈉對(duì)大腸菌的上述代謝活動(dòng)都沒(méi)有抑制作用。
配方：（g/L）
將蛋白胨、乳糖溶于約500ml蒸餾水中，加入牛膽粉溶液200ml（將20.0g脫水牛膽粉溶于200ml蒸餾水中，調(diào)節(jié)pH至7.0～7.5），用蒸餾水稀釋到975ml，調(diào)節(jié)pH，再加入0.1%煌綠水溶液13.3ml，用蒸餾水補(bǔ)足到1000ml，用棉花過(guò)濾后，分裝到有玻璃小倒管的試管中，每管10ml。121℃高壓滅15min。
3伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)Eosin-MethyleneBlueAgar
原理：
伊紅美藍(lán)瓊脂含有伊紅和美藍(lán)兩種苯胺類染料，它們可以抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng)。伊紅為酸性染料，美藍(lán)為堿性染料。當(dāng)大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸時(shí)細(xì)菌帶正電荷被染成紅色，再與美藍(lán)結(jié)合形成紫黑色菌落，并帶有綠色金屬光澤。而產(chǎn)氣桿菌則形成呈棕色的大菌落。
在堿性環(huán)境中不分解乳糖產(chǎn)酸的細(xì)菌不著色，伊紅和美藍(lán)不能結(jié)合，故沙門氏菌等為無(wú)色或琥珀色半透明菌落。金葡菌在此培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)。
常用的伊紅美藍(lán)乳糖培養(yǎng)基，可用來(lái)鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌等細(xì)菌。如果有大腸桿菌，因其強(qiáng)烈分解乳糖而產(chǎn)生大量的混合酸，菌體帶H+，故菌落被染成深紫色，從菌落表面的反射光中還可以看到金屬光澤。
配方：（g/L）
稱取本品37.4g,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。
4EC肉湯(E.ColiBroth)
用途：
用于糞大腸菌群、大腸桿菌的測(cè)定(GB2008、SN標(biāo)準(zhǔn))
配方：（g/L）
用途：
細(xì)菌計(jì)數(shù)、不含糖，可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用(GB標(biāo)準(zhǔn))。
配方：（g/L）