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MA104 長尾綠猴腎細胞
admin / 2013-05-14 06:16:49

   細胞系特征

微生物菌種查詢網(wǎng)編號:KCB201001YJ

細胞株名稱:MA104 長尾綠猴腎細胞

種屬: Cercopithecus aethiops

組織來源:胚胎 腎

生長特性:貼壁生長

形態(tài)特征:上皮樣細胞

Virus Susceptibility:Simian rotavirus

支原體:(-)

培養(yǎng)條件:完全培養(yǎng)基:90%MEM培養(yǎng)液(內(nèi)含2mM L-glutamine)+10%胎牛血清

培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%

傳代方法:收到細胞后,在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況:

如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

如果細胞已長滿(達80-90%),即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后將培養(yǎng)瓶翻過來讓胰酶與細胞面接觸大約10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量完全培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加完全培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,收到細胞后的第一次傳代一般是一傳三。

注:1、觀察細胞最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度。

2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

3、有些細胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。

4、收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們聯(lián)系。

凍存方法:凍存液:90%完全培養(yǎng)液,10%DMSO.現(xiàn)用現(xiàn)配

儲存:液氮儲存


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