擴展青霉（測序正確）的培養(yǎng)及保藏方法！
小楊 / 2019-12-23 09:04:45
擴展青霉的菌落小斑點狀，草綠色；背面肉桂色，中央有紅色的小點。分生孢子梗頂端1-2次帚狀分枝，瓶狀小梗細長。分生孢子扁圓形或圓形，集聚時呈青綠色，分生孢子很小，大小為1.8-2.2×1.8-2.2μm。
基本信息
平臺編號：bio-25700
規(guī)格：凍干物
拉丁屬名：Penicillium expansum Link
中文名：擴展青霉（測序正確）
詳情介紹
中文名稱：青霉菌
拉丁屬名：Penicillium
種名加詞：expansum Link
收藏時間*：2007-7-16
來源歷史：山東果樹所轉(zhuǎn)
原產(chǎn)國：中國
資源歸類編碼：15151913115
模式菌株：非模式菌株
主要用途：研究；教學(xué)
特征特性：菌落在查氏酵母膏瓊脂(CYA)上生長較快，25℃7天直徑35-45mm，較厚，平坦；質(zhì)地絨狀兼有孢梗束而成顆粒狀；分生孢子結(jié)構(gòu)大量，灰黃綠色，近于暗硃砂綠色(Dark Cinnabar Green, Ridgway Pl. XIX)或鎳綠色(Nickel Green, Ridgway Pl. XXXIII)；菌絲白色；滲出液較多，無色至橙褐色；可溶性色素?zé)o至較多，褐色；反面黃褐色至棕色。分生孢子梗發(fā)生于基質(zhì)菌絲和孢梗束，孢梗莖120-500×3.0-4.0цm，壁平滑；帚狀枝三輪生，偶有雙輪生，彼此較緊密
具體用途：化學(xué)農(nóng)藥、生物農(nóng)藥篩選；抗病植物材料篩選；抗病基因、致病基因發(fā)掘。
生物危害程度：四類
寄主中文名稱：桃
寄主拉丁名稱：
致病對象：植物
致病名稱：桃青霉病菌
分離基物：桃幼成熟果實
采集地區(qū)：山東泰安
采集具體地點：丘陵地果園
培養(yǎng)基信息：培養(yǎng)基編號：14 培養(yǎng)基名稱：PDA
培養(yǎng)溫度：26
資源保護類型：培養(yǎng)物
保藏方法：定期移植法
共享方式：資源交換性共享
提供形式：斜面培養(yǎng)物
實物狀態(tài)：有實物
培養(yǎng)及打管說明：
1、擴展青霉安瓿瓶開封：用浸過75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)：用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基，滴入安瓿管內(nèi)，輕輕振蕩，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液，移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中，并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項：菌種活化前，請將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后，延遲期較長，需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
菌種的培養(yǎng)：
1、擴展青霉菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。
擴展青霉保藏方法
1、傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧細菌用），培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2、液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當(dāng)延長保藏時間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡，另一方面可阻止氧氣進入，以減弱代謝作用。
3、載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4、寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物，如病毒、立克次氏體、螺旋體等，它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內(nèi)感染并傳代，此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進行保藏。
5、冷凍保藏法
可分低溫冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速凍結(jié)（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。