馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)的應(yīng)用！
小楊 / 2019-12-12 09:04:32
一、概述
馬鈴薯葡萄糖瓊脂是食用菌母種最常用培養(yǎng)基之一，可用于霉菌，酵母菌計數(shù)。配方如下：馬鈴薯200g制成浸出液，葡萄糖20g，瓊脂15?20g，水1000mL，不調(diào)節(jié)pH。制備方法如下：取新鮮馬鈴薯200g，洗凈去皮切成小塊，加水煮沸20?30min（能被玻璃棒戳破即可），然后用四層紗布過濾，再根據(jù)需要加入葡萄糖或蔗糖20g和瓊脂15?20g，繼續(xù)加熱攪勻，稍冷卻后補足水分至1000mL制備PDA培養(yǎng)基有時可加入氯霉素或土霉素等抑制細菌的生長，減少干擾。若不加瓊月旨，可用于真菌的液體培養(yǎng)。
二、產(chǎn)品用法
稱取本品 46.0g,加入 1000ml 蒸餾水中,115℃高壓滅菌 20分鐘,備用。滅菌好的培養(yǎng)基僅可重復加熱熔化一次。
三、微生物靈敏度試驗
按標簽用法制備培養(yǎng)基，接種以下質(zhì)控菌株，放置20-25℃需氧培養(yǎng)48-72小時。注：回收率計算時，用SDA 瓊脂做對照培養(yǎng)基。
四、制備
其配方為馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克，水1000毫升。制作時先將馬鈴薯去皮，洗凈，發(fā)芽薯塊要挖去芽眼(因芽眼處含龍葵堿，有毒)，切成薄片，加水煮沸直至軟而不爛，用8層紗布(經(jīng)浸濕擰干)過濾取汁。然后將浸水漂洗并擰干的瓊脂加入馬鈴薯液汁中，煮至全部融化，再用紗布過濾，加水補足至1000毫升。最后加葡萄糖攪拌溶化后分裝試管、滅菌。本培養(yǎng)基適用于培養(yǎng)和保藏各種食用菌。
五、應(yīng)用
CN201110315661提供一種桑黃菌絲體的制備方法。步驟包括：桑黃菌種活化；馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板培養(yǎng)；刮取桑黃菌絲體接種于馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基中進行振蕩培養(yǎng)；收集桑黃菌絲體；提取桑黃菌絲體總RNA；瓊脂糖凝膠電泳觀察結(jié)果。本發(fā)明使用的菌種是保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)桑黃菌種(鮑姆層孔菌，保藏號為桑黃DL101 CCTCC M 2011137)。本發(fā)明操作簡單，原理易懂，為今后獲得大規(guī)模的、高純度的桑黃菌絲體和高質(zhì)量的桑黃總RNA提供了簡便快捷的方法，也為桑黃的基礎(chǔ)研究和應(yīng)用開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。
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