腦膜炎奈瑟菌微生物學(xué)檢驗(yàn)及方法！
小楊 / 2019-11-18 09:37:47
腦膜炎奈瑟菌（N. meningitidis）簡稱為腦膜炎球菌（meningococcus），是流行性腦脊髓膜炎（簡稱流腦）的病原菌。腎形或豆形革蘭陰性雙球菌，兩菌接觸面平坦或略向內(nèi)陷，直徑0.6~0.8μm。人工培養(yǎng)后可成卵圓形或球狀，排列較不規(guī)則，單個(gè)、成雙或4個(gè)相聯(lián)等。在孵育24h后的培養(yǎng)物中，常呈現(xiàn)衰退形態(tài)，菌體大小較不一致，著色亦深淺不勻。在患者腦脊液中，多位于中性粒細(xì)胞內(nèi)，形態(tài)典型。新分離菌株大多有莢膜和菌毛。
腦膜炎雙球菌（學(xué)名Neisseria meningitidis），又名腦膜炎奈瑟菌或腦脊髓膜炎雙球菌，簡稱為腦膜炎球菌，是一種革蘭氏陰性菌，因其所導(dǎo)致的腦膜炎而聞名，亦會(huì)造成腦膜炎球菌血癥(一種致命性的敗血癥)。它只感染人類，并無寄生的動(dòng)物，是唯一令細(xì)菌性感染腦膜炎成為流行病的病菌。約10%成人的鼻咽中有它的蹤跡。下面由小編為大家介紹一下腦膜炎奈瑟菌微生物學(xué)檢驗(yàn)及方法。
⒈標(biāo)本采集：血液；瘀斑滲出液；腦脊液；鼻咽分泌物。因本菌能產(chǎn)生自溶酶，易自溶，故采集的標(biāo)本不宜置冰箱，應(yīng)立即送檢。
注意：該菌能產(chǎn)生自溶酶，易自溶，故采集時(shí)標(biāo)本不宜放冰箱，應(yīng)保溫立即送檢。必要時(shí)可作雙份血清測定抗體效價(jià)的變化。
⒉檢驗(yàn)方法及鑒定
1）直接涂片檢查：
①瘀血斑：刺破瘀斑血印片，或血膜片，干燥固定后革蘭染色陰性雙球菌，呈腎形成對(duì)排列，可初診。
②腦脊液：取腦脊液離心后沉淀物涂片，干燥固定后革蘭染色，若發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞內(nèi)或胞外革蘭陰性雙球菌，呈腎形成對(duì)排列，結(jié)合臨床可確診。
2）分離培養(yǎng)：將標(biāo)本葡萄糖肉湯增菌培養(yǎng)液，直接接終于血瓊脂平板、巧克力瓊脂平板，置于5%-10%CO2環(huán)境中，35℃培養(yǎng)18-24小時(shí)后可見圓形、灰褐色、濕潤、光滑、邊緣整齊、直徑1-2mm的小菌落，經(jīng)涂片證實(shí)為革蘭陰性雙球菌，并進(jìn)一步根據(jù)相應(yīng)的生化反應(yīng)等試驗(yàn)予以鑒定。
3）鑒定：該菌鑒定主要通過氧化酶、糖類發(fā)酵和血清學(xué)等試驗(yàn)以及培養(yǎng)生長特點(diǎn)進(jìn)行。
①細(xì)菌染色形態(tài)；②氧化酶試驗(yàn)陽性；③觸酶試驗(yàn)陽性；④分解葡萄糖、麥芽糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；⑤莢膜多糖抗原直接凝集試驗(yàn)。
⒊結(jié)果評(píng)價(jià)和報(bào)告
重視腦脊液和瘀點(diǎn)穿刺物的直接鏡檢，這是最快速確證腦膜炎奈瑟菌的簡便方法。
直接鏡檢為革蘭染色陰性雙球菌，可初報(bào)，經(jīng)分離培養(yǎng)后見菌落特征典型、生化反應(yīng)能力弱，只分解葡萄糖、麥芽糖、產(chǎn)生少量酸，氧化酶試驗(yàn)陽性，可報(bào)“檢出腦膜炎耐瑟菌”。快速乳膠凝集試驗(yàn)陽性。
⒋治療原則：青霉素G為首選，三代頭孢對(duì)腦膜炎奈瑟菌也具有很強(qiáng)的抗菌活性。青霉素過敏的病人可考慮選用三代頭孢或氯霉素。
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