一、實驗目的
學習用質(zhì)壁分離法和用活體染色法鑒定細胞死活。
二、實驗原理
活細胞與死細胞在性質(zhì)上有許多差別，特別是通透性的變化最為明顯?；罴毎脑|(zhì)具有選擇透過性；而死細胞則為全透性。選擇透過性是質(zhì)壁分離的先決條件。因此能發(fā)生質(zhì)壁分離的細胞就表示是活的，不能發(fā)生質(zhì)壁分離的細胞則說明是死的。
死活細胞間不僅通透性不同，而 pH 值等情況也不同，它們對某些染料的反應明顯不同。某些染料能在活細胞的細胞液中積累，但不能染活的原生質(zhì)；另一方面，這些染料可使死細胞的原生質(zhì)染色，但不積累于液泡。所以可根據(jù)某些染料活體染色的情況來鑒定細胞死活。
三、實驗材料和用具
洋蔥及其它植物材料、酒精燈、顯微鏡、刀片、鑷子、載玻片、蓋玻片、 1M 蔗糖、 0.01% 中性紅溶液等。
四、實驗步驟
⒈用質(zhì)壁分離的方法鑒定細胞的死活。
撕洋蔥表皮細胞滴加 IM 蔗糖中，在顯微鏡下觀察。細胞很快發(fā)生質(zhì)壁分離，這就是細胞活著的證據(jù)。另把制取的同樣制片，用冷凍、加熱、干燥、酒精浸泡等方法將它們的細胞殺死，然后取代上述活材料，做質(zhì)壁分離實驗，結果看到已死的細胞不能發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象。
用尿素、硝酸鉀、氯化鈣溶液等來代替蔗糖，能快速鑒定細胞的死活。
⒉用活體染色的方法的鑒定細胞的死活。
取洋蔥或其它材料，用鑷子撕下表皮（如表皮不易撕下，也可在水中用鋒利的刀片輕輕刮去多余部分），或用刀片做成切片若干，將表皮或切片浸入中性紅溶液中，放置 5-10 分鐘最出用清水浸洗后置于載玻片上，加蓋玻片，在顯微鏡下觀察。
活細胞一般在液泡內(nèi)染成紅色至紫色，原生質(zhì)不染色，死細胞常呈橙紅色，原生質(zhì)和細胞核被染色。撕破的細胞，只剩細胞壁時，呈淡紅色或淡紫色。
為進一步鑒別細胞的死活，可把玻片上的水溶液吸去，滴一滴 1M 蔗糖溶液，便可觀察到活細胞能發(fā)生質(zhì)壁分離，死細胞及空細胞都有沒有這種現(xiàn)象。
可用加熱、冷凍或其它方法殺死植物組織，然后用上面所述方法進行處理，比較與活組織有何不同。
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