冷凍干燥保藏轉(zhuǎn)接技術(shù)
建議用下列方法恢復(fù)培養(yǎng)冷凍干燥保藏的菌種。
1、安瓶管開封
用浸過70％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管。
用火焰將安瓿管頂端加熱。
滴無菌水至加熱的安瓿管頂端使玻璃開裂。
用挫刀或鑷子敲下已開裂的安瓿管的頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)
用無菌吸管，吸取0.3-0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴人安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍于菌體溶解呈懸浮狀
取0.1-0.2ml菌體懸浮液，移植于適宜的瓊脂斜面/平板培養(yǎng)基上，剩余的菌液，注入適宜的液體培養(yǎng)基內(nèi)，然后在建議的溫度下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng)
菌種活化前，請將安瓿管保存在6一10℃的環(huán)境下。
厭氧菌的培養(yǎng)，如無特別說明，自開封至接種完成，均需以無氧氣體充填，以保持厭氧狀態(tài)。
某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后,延遲期較長,需連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長,此時(shí)請將步驟二重復(fù)一次。