布魯氏菌AMOS-PCR多重PCR檢測鑒定方法是根據(jù)布魯氏菌不同種插入序列IS711位置的不同而設計引物。利用AMOS-PCR方法,在不同種的布魯氏桿菌中能夠得出不同的擴增片段,通過擴增條帶的大小來鑒別布魯氏菌種。AMOS-PCR方法有較強的應用價值,可作為快速檢測鑒定布魯氏菌的方法之一。
1994年,Bricker和Halling將多重PCR方法應用于布魯氏菌的檢測鑒定研究,建立了AMOS-PCR (Abortus Melitensis Ovis Suis第一個字母的縮寫)檢測鑒定分型方法。
AMOS-PCR是根據(jù)布魯氏菌不同種插入序列IS711位置的不同而設計引物,其他不同的引物分別位于插入序列鄰近的染色體DNA上。即設計一個共用引物錨定于插入序列IS711上,再以羊布魯氏菌生物1、2和3型特有序列設計引物BM,以豬布魯氏菌生物1型特有序列設計引物BS,以牛布魯氏菌生物1、2和4型特有序列設計引物BA,以綿羊附睪種布魯氏菌特有序列設計引物BO。
AMOS-PCR多重PCR鑒定布魯氏菌的引物
通過AMOS-PCR設計的5條引物,在不同種的布魯氏桿菌中能夠得出不同的擴增片段,代表種的特異性,通過擴增條帶的大小來鑒別布魯氏菌種。應用該方法可在短時間內(nèi)鑒定牛種布魯氏菌(1、2、3型),羊種布魯氏菌(1、2、3型),豬種布魯氏菌(1型)以及綿羊附睪種布魯氏菌。有大量研究利用AMOS-PCR對不同布魯氏菌分離株進行了檢測鑒定,檢測結(jié)果與表型鑒定的吻合度非常高,且對部分表型鑒定的非典型菌株也可以做出鑒定。AMOS-PCR方法有較強的應用價值,可作為快速鑒定布魯氏菌的方法之一。
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