一、液體培養(yǎng)基-石蕊牛乳培養(yǎng)基
⒈用途
觀察細(xì)菌對(duì)牛乳的凝固及發(fā)酵作用
⒉配法
新鮮脫脂牛乳1L , 20g / L 石蕊水溶液10ml（16g / L 溴甲酚紫乙醇溶液lml）( pH6.8 ）。
將新鮮牛乳隔水煮沸30min ，冷卻后置4 ℃ 冰箱內(nèi)過夜。用吸管吸出下層乳汁，注入另一燒瓶?jī)?nèi)，棄去上層乳脂。加入石蕊溶液，分裝試管，滅菌113 ℃ 15min （或間歇滅菌）。置35℃ 培養(yǎng)24-48h ，若無細(xì)菌生長(zhǎng)，即可4 ℃ 冷藏備用。
⒊用法
將被檢菌接種于上述培養(yǎng)基中，若為芽胞梭菌，要在培養(yǎng)基內(nèi)加入微量鐵末，于35℃ 培養(yǎng)8-24h 必要時(shí)可延長(zhǎng)至14 天。
⒋觀察結(jié)果
產(chǎn)酸 因發(fā)酵乳糖而產(chǎn)酸，使指示劑變?yōu)榉奂t色
產(chǎn)氣 發(fā)酵乳糖同時(shí)產(chǎn)氣，可沖開上面的凡士林
凝固 因產(chǎn)酸太多而使牛乳中的酪蛋白凝固
胨化 將凝固的酪蛋白繼續(xù)水解為胨，培養(yǎng)基上層液體變清，底部可留有未被完全胨化的酪蛋白
產(chǎn)堿 乳糖不發(fā)酵，因分解含氮物質(zhì)，生成胺及氨，培養(yǎng)基變堿，指示劑變?yōu)樗{(lán)色
不變 乳糖不發(fā)酵，指示劑無變化，與未接種管相同
白色 石蕊被還原成白色
⒌質(zhì)量控制
糞產(chǎn)堿桿菌，堿性反應(yīng)，培養(yǎng)基呈藍(lán)色；變形桿菌，沒有變化，培養(yǎng)基仍呈紫色；產(chǎn)氣莢膜梭菌，急驟發(fā)酵，酸凝塊被氣體破壞
注：培養(yǎng)基在滅菌前加入凡士林，可觀察厭氧菌對(duì)牛乳中乳糖分解清況。若全脂牛奶需行脫脂處理，該培養(yǎng)基pH6.8，呈紫色
二、皰肉培養(yǎng)基
⒈用途
主要用于梭菌屬的培養(yǎng)
⒉配方
牛肉渣0.5g，牛肉浸液7ml（pH 7.6 ）。
將干燥的肉渣0.5g裝入15mm×150mm試管內(nèi)，再加入pH7.6牛肉浸液7ml，兩者高度比例為1：2 。
在試管液面上加一層3-4mm厚度的融化凡士林。用橡皮塞塞緊，經(jīng)121 ℃ 滅菌15min 后，置4 ℃ 冰箱備。
⒊用法
將各種采集的標(biāo)本，在2h 內(nèi)取0.5ml種入培養(yǎng)基底層，立即置35-37℃ 厭氧恒溫箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，2-7天觀察結(jié)果。若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基有混濁、沉淀、粘性菌膜生長(zhǎng)現(xiàn)象，及培養(yǎng)物的臭味、肉渣的消化、變色、產(chǎn)氣等清況，用以判斷結(jié)果，并進(jìn)行涂片染色鏡檢及分離培養(yǎng)。一般在培養(yǎng)48h 以后開始觀察，直至3 周，無細(xì)菌生長(zhǎng)，即可報(bào)告陰性
⒋質(zhì)量控制
破傷風(fēng)桿菌或壞死梭桿菌48h 的培養(yǎng)物稀釋1 000 倍，接種0.01 ml，生長(zhǎng)良好
⒌保存
置4 ℃ 冰箱內(nèi)，數(shù)月有效
注：培養(yǎng)基的管口要密封，使用時(shí)將培養(yǎng)基置于水浴中煮沸10min ，以除去管內(nèi)殘存的氧。為提高培養(yǎng)效果，在底層可放少許鐵粉作為還原劑。
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