ATCC原代細胞被金葡菌污染后的補救方法！
小楊 / 2019-09-07 08:36:19
<ATCC原代細胞>
實驗室常見的細胞污染通常是細菌以金黃色葡萄球菌和大腸桿菌多見，以及霉菌，黑蛟蟲，支原體和真菌。其中真菌最難發(fā)現(xiàn)污染，也最難處理，而霉菌和支原體等不是雙抗能解決的。
小編曾經(jīng)遇到貼壁細胞污染，經(jīng)病原微生物的老師鑒定是金葡菌污染所致，處理方法和樓主大同小異，但相對簡便，最后把從ATCC購買的原代細胞救過來了。
小編簡單把自己的操作步驟整理下，分享給大家：
1.倒掉培養(yǎng)液，用火烤瓶口和瓶蓋大約1分鐘
2.用大量的PBS反復(fù)沖洗，每次約30ML，重復(fù)5次
注意：在用火烤瓶口和瓶蓋（如果是一次性培養(yǎng)瓶 時間不能太長，以免軟化變性）
3.加入5ML雙抗，37度，5分鐘
注意：PBS沖洗兩次
4.加入雙抗2ML，室溫5分鐘
注意：PBS沖洗兩次
5.加入培養(yǎng)液10ml 雙抗2ML 6小時后換液
6.重新加入培養(yǎng)液雙抗?jié)舛入S污染情況調(diào)整，連續(xù)5-7天
7.對于培養(yǎng)箱需要徹底全面消毒
8.碘伏消毒作用10分后酒精消毒10分鐘，重復(fù)兩次
9.紫外照射一小時
污染的細胞因為是原代，根本沒有凍存，上述方法處理后傳到第3代，在后來的激光共聚焦顯微鏡檢測沒有見到細胞形態(tài)異常。
細胞污染除了自己注意外，還要嚴防實驗室的'新手'，無菌觀念不能馬虎??！
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