ATCC菌種米曲霉（Aspergillus oryzae）的結(jié)構(gòu)及培養(yǎng)介紹！
中國(guó)微生物菌種查詢網(wǎng) / 2018-10-25 08:45:52
一、結(jié)構(gòu)
米曲霉菌落生長(zhǎng)快，10d直徑達(dá)5~6cm，質(zhì)地疏松，初白色、黃色，后變?yōu)楹稚恋G褐色。背面無(wú)色。分生孢子頭放射狀，一直徑150~300μm，也有少數(shù)為疏松柱狀。分生孢子梗2mm左右。近頂囊處直徑可達(dá)12~25μm，壁薄，粗糙。頂囊近球形或燒瓶形，通常40~50μm。小梗一般為單層，12~15μm，偶爾有雙層，也有單、雙層小梗同時(shí)存在于一個(gè)頂囊上。分生孢子幼時(shí)洋梨形或卵圓形，老后大多變?yōu)榍蛐位蚪蛐?，一?.5μm，粗糙或近于光滑。
分生孢子梗長(zhǎng)約2mm，近頂囊處直徑達(dá)12～25μm，壁薄而精糙。頂囊近球形或燒瓶形，直徑40～50μm，上覆單層小梗。分生孢子幼時(shí)洋梨形或隨圓形，成熟后為球形或近球形，直徑4.5～7.0μm，表面粗糙或近于光滑。分生孢子頭直徑150～300μm。
ATCC菌種 菌落生長(zhǎng)較快，質(zhì)地疏松。初呈白色、黃色，后轉(zhuǎn)黃褐色至淡綠褐色，背面無(wú)色，分布甚廣，主要在糧食、發(fā)酵食品、腐敗有機(jī)物和土壤等處。是我國(guó)傳統(tǒng)釀造食品醬和醬油的生產(chǎn)菌種。也可生產(chǎn)淀粉酶、蛋白酶、果膠酶和曲酸等。會(huì)引起糧食等工農(nóng)業(yè)產(chǎn)品霉變。
在生產(chǎn)上的作用
在淀粉酶的作用下，將原料中的直鏈、支鏈淀粉降解為糊精及各種低分子糖類，如麥芽糖、葡萄糖等；在蛋白酶的作用下，將不易消化的大分子蛋白質(zhì)降解為蛋白胨、多肽及各種氨基酸，而且可以使輔料中粗纖維、植酸等難吸收的物質(zhì)降解，提高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、保健功效和消化率，廣泛應(yīng)用于食品、飼料、生產(chǎn)曲酸、釀酒等發(fā)酵工業(yè)，并已被安全地應(yīng)用了1000多年。米曲霉基因組的破譯，也為研究由曲霉屬真菌引起的曲霉病提供了線索。
二、米曲霉的培養(yǎng)
固態(tài)培養(yǎng)方法（ solid state cultivation ） ：主要有散曲法和塊曲法。部分黃酒用曲，紅酒及醬油米曲霉培養(yǎng)屬散曲法，而黃酒用曲及白酒用曲一般采用塊曲法。
固態(tài)制曲設(shè)備：實(shí)驗(yàn)室主要采用三角瓶或茄子瓶培養(yǎng)；種子擴(kuò)大培養(yǎng)可將蒸熱的物料置于竹匾中，接種后在溫度和濕度都有控制的培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)；工業(yè)上目前主要是厚層通風(fēng)池制曲；轉(zhuǎn)式圓盤式固態(tài)培養(yǎng)裝置正在試驗(yàn)推廣之中。
固態(tài)培養(yǎng)微生物，主要用于霉菌的培養(yǎng)，但細(xì)菌和酵母也可采用此法。其主要優(yōu)點(diǎn)是節(jié)能，無(wú)廢水污染。單位體積的生產(chǎn)效率教高。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
米曲霉菌種的純化，制成斜面，將斜面菌種接入 250ml 三角瓶培養(yǎng)成種曲，再將種曲擴(kuò)大培養(yǎng) （ 500ml ）三角瓶。
米曲霉培養(yǎng)：
分為斜面培養(yǎng)和三角瓶培養(yǎng)兩個(gè)階段。三角瓶培養(yǎng)物在工廠中作為一級(jí)種子。試管斜面培養(yǎng)基：豆餅浸出汁： 100 克豆餅，加水 500ml ，浸泡 4 小時(shí)，煮沸 3-4 小時(shí)，紗布自然過(guò)濾，取液，調(diào)整至 5 波美度。每 100ml 豆汁加入可溶性淀粉 2 克，磷酸二氫鉀 0.1 克，硫酸鎂 0.05 克，硫酸銨 0.05 克，瓊脂 2 克，自然 pH ?；虿捎民R鈴薯培養(yǎng)基：馬鈴薯 200 克，葡萄糖 20 克 ，瓊脂 15-20 克，加水至 1000ml ，自然 pH 。
三角瓶培養(yǎng)基制備：
米曲霉的培養(yǎng)基 ：
1 ：麩皮 40 克，面粉（或小麥） 10 克，水 40ml 。
2 ：豆粕粉 40 克，麩皮 36 克，水 44ml 。
裝料厚度 ： 1cm 左右；
滅菌： 120 ℃，30min；
接種及米曲霉的培養(yǎng)條件： 米曲霉固態(tài)培養(yǎng)主要控制條件：溫度，濕度，裝料量，基質(zhì)水分含量。固態(tài)培養(yǎng)前，原料的蒸熟及滅菌是同時(shí)進(jìn)行的，實(shí)驗(yàn)室一般是在高壓滅菌鍋中進(jìn)行；但在工廠中則是原料的煮熟和滅菌與發(fā)酵分別在不同的設(shè)備中進(jìn)行。這點(diǎn)與液態(tài)發(fā)酵是不同的。 28-30℃，培養(yǎng)20小時(shí)后，菌絲應(yīng)布滿培養(yǎng)基，第一次搖瓶，使培養(yǎng)基松散；每隔8小時(shí)檢查一次，并搖瓶。培養(yǎng)時(shí)間一般為72小時(shí)。
3. 實(shí)驗(yàn)儀器、設(shè)備和材料
恒溫培養(yǎng)箱或者固態(tài)培養(yǎng)室，負(fù)壓式超凈工作臺(tái)，顯微鏡，水浴鍋，試管，茄子瓶，平板和 500ml 三角瓶等。