生化實(shí)驗(yàn)為什么要加液體石蠟？
中國(guó)微生物菌種查詢網(wǎng) / 2018-10-16 10:55:47
生化實(shí)驗(yàn)為什么要加液體石蠟？有兩個(gè)原因，1.創(chuàng)造厭氧環(huán)境。2.防止培養(yǎng)基成分揮發(fā)
一、創(chuàng)造厭氧環(huán)境
（1）葡萄糖利用、酚紅葡萄糖利用
GB4789.14-2003中蠟樣芽孢桿菌葡萄糖利用和SN0176-92中蠟樣芽孢桿菌酚紅葡萄糖利用實(shí)驗(yàn)中，為了測(cè)定厭氧環(huán)境下蠟樣芽孢桿菌可以利用葡萄糖產(chǎn)酸，因此為創(chuàng)造厭氧環(huán)境，須在接菌后滴加液體石蠟進(jìn)行液封。
（2）O/F實(shí)驗(yàn)
SN 0173-1992 中副溶血性弧菌檢測(cè)，對(duì)葡萄糖的發(fā)酵型和氧化型的代謝作用，在實(shí)驗(yàn)時(shí)向其中一只管滴加石蠟隔絕氧氣，另一只不滴加；發(fā)酵型菌株在兩只管中均發(fā)酵產(chǎn)酸；而氧化型只在未滴加石蠟的管中發(fā)酵產(chǎn)酸，而在滴加石蠟的管中不生長(zhǎng)或輕度生長(zhǎng)，從而區(qū)分出發(fā)酵型和氧化型。
（3）氨基酸脫羧酶實(shí)驗(yàn)：
進(jìn)行氨基酸脫羧酶實(shí)驗(yàn)時(shí)，在實(shí)驗(yàn)管和氨基酸對(duì)照管中滴加菌液后需分別向各管中滴加2-3滴液體石蠟，進(jìn)行液封。原因如下：某些菌在特定氨基酸存在情況下，誘導(dǎo)產(chǎn)生相應(yīng)氨基酸脫羧酶，使氨基酸脫羧，產(chǎn)生一種堿性物質(zhì)—尸胺，而該物質(zhì)在厭氧條件下可穩(wěn)定存在，使得培養(yǎng)基環(huán)境pH升高，克服培養(yǎng)基本身的酸性環(huán)境以及葡萄糖代謝產(chǎn)生的酸，從而使培養(yǎng)基呈紫色；而對(duì)照管中不含氨基酸，菌株利用葡萄糖產(chǎn)酸，培養(yǎng)基環(huán)境pH下降，使得培養(yǎng)基變黃。滴加液體石蠟主要目的是創(chuàng)造厭氧環(huán)境，并防止酸揮發(fā)。
二、防止培養(yǎng)基成分揮發(fā)
氰化鉀實(shí)驗(yàn)：
氰化鉀是劇毒藥物，使用時(shí)需加小心以免中毒。因此在做氰化鉀實(shí)驗(yàn)時(shí)，需在實(shí)驗(yàn)管和對(duì)照管同時(shí)滴加液體石蠟，滴加目的其一是為防止氰化鉀揮發(fā)，以免造成操作者中毒；第二是防止氰化鉀揮發(fā)后，致使藥物濃度降低，細(xì)菌生長(zhǎng)，出現(xiàn)假陽(yáng)性。