本文主要介紹了四種酵母培養(yǎng)基的配制方法與原理，主要包括麥芽汁培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基、豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基的制備原理和方法。具體如下：
一、基本原理
麥芽汁培養(yǎng)基和馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基被廣泛用于培養(yǎng)酵母菌和霉菌。馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基有時也可用于培養(yǎng)放線菌。豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基也是培養(yǎng)酵母菌及霉菌的一種優(yōu)良培養(yǎng)基。察氏培養(yǎng)基主要用于培養(yǎng)霉菌觀察形態(tài)用。麥芽汁培養(yǎng)基為天然培養(yǎng)基，馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基和豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基二者均為半合成培養(yǎng)基，而察氏培養(yǎng)基則為合成培養(yǎng)基。培養(yǎng)基配方中出現(xiàn)的自然pH系指培養(yǎng)基不經(jīng)酸、堿調(diào)節(jié)而自然呈現(xiàn)的pH。
二、實驗材料
(1)藥品
葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4·7H2O，F(xiàn)eS04、瓊脂。
(2)儀器
天平、高壓蒸汽滅菌鍋。
(3)玻璃器皿
移液管、試管、錐形瓶、燒杯、量筒、培養(yǎng)皿、玻璃漏斗等。
(4)其他物品
藥匙、pH試紙、稱量紙、記號筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報紙、新鮮麥芽汁、黃豆芽、馬鈴薯等。
三、實驗內(nèi)容
(一)麥芽汁培養(yǎng)基的配制
1.培養(yǎng)基成分
新鮮麥芽汁一般為10-15波林。
2.配制方法
(1)用水將大麥或小麥洗凈，用水浸泡6-12h，置于15℃陰涼處發(fā)芽，上蓋紗布，每日早、中、晚淋水一次，待麥芽伸長至麥粒的兩倍時，讓其停止發(fā)芽，曬干或烘干，研磨成麥芽粉，貯存?zhèn)溆谩?
(2)取一份麥芽粉加四份水，在65℃水浴鍋中保溫3-4h，使其自行糖化，直至糖化完全(檢查方法是取0.5ml的糖化液，加2滴碘液，如無藍色出現(xiàn)，即表示糖化完全)。
(3)糖化液用4-6層紗布過濾，濾液如仍混濁，可用雞蛋清澄清(用一個雞蛋清，加水20ml，調(diào)勻至生泡沫，倒入糖化液中，攪拌煮沸，再過濾)。
(4)用波美比重計檢測糖化液中糖濃度，將濾液用水稀釋到10-15波林，調(diào)pH至6.4。如當?shù)赜衅【茝S，可用未經(jīng)發(fā)酵，未加酒花的新鮮麥芽汁，加水稀釋到10-15波林后使用。
(5)如配固體麥芽汁培養(yǎng)基時，加入2%瓊脂，加熱融化，補充失水。
(6)分裝、加塞、包扎。
(7)高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。
(二)馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的配制
1.培養(yǎng)基成分
馬鈴薯20g
葡萄糖2g
瓊脂1.5-2g
水100ml
自然pH
2.配制方法
(1)配制20%馬鈴薯浸汁取去皮馬鈴薯200g，切成小塊，加水1000ml。80℃浸泡lh，用紗布過濾，然后補足失水至所需體積。100Pa滅菌20min。即成20%馬鈴薯浸汁，貯存?zhèn)溆谩?
(2)配制時，按每100ml馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖，加熱煮沸后加入2g瓊脂，繼續(xù)加熱融化并補足失水。
(3)分裝、加塞、包扎。
(4)高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。
(三)豆芽汁葡萄糟培養(yǎng)基的配制
1.培養(yǎng)基成分
黃豆芽10g
葡萄糖5g
瓊脂1.5-2g
水100ml
自然pH
2.配制方法
(1)稱新鮮黃豆芽10g，置于燒杯中，再加入100ml水，小火煮沸30min，用紗布過濾，補足失水，即制成10%豆芽汁。
(2)配制時，按每100ml10%豆芽汁加入5g葡萄糖，煮沸后加入2g瓊脂，繼續(xù)加熱融化，補足失水。
(3)分裝、加塞、包扎。
(4)高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。
(四)察氏(czapck)培養(yǎng)基的配制
1.培養(yǎng)基成分
蔗糖3g
NaN030.3g
K2HP040.1g
KCl0.05g
MgSO4·7H2O0.05g
FeS040.001g
瓊脂1.5-2g
蒸餾水100ml
自然pH
2.配制方法
(1)稱量及溶化量取所需水量約2/3左右加入到燒杯中，分別稱取蔗糖、NaNO3、K2HP04、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100ml培養(yǎng)基加入1ml0.1%的FeS04溶液。
(2)定容候藥品全部溶解后，將溶液倒入量筒中，加水至所需體積。
(3)加瓊脂加入所需量瓊脂，加熱融化，補足失水。
(4)分裝、加塞、包扎。
(5)高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。
注意事項：這四種培養(yǎng)基的配制無需用酸或者堿調(diào)節(jié)pH，滅菌20分鐘足夠了，時間過長容易把培養(yǎng)基成分破壞掉，太短了容易造成污染。