1標(biāo)準(zhǔn)菌株復(fù)活
購(gòu)回的標(biāo)準(zhǔn)菌株一般為安培裝凍干粉劑，依照隨產(chǎn)品附有的菌種復(fù)活方法，以及〈〈人間傳染病微生物分類(lèi)目錄〉〉和〈〈實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求〉〉，在相應(yīng)的生物安全水平下，開(kāi)啟包裝。用75%酒精棉球擦拭安培瓶上部，可用砂輪或銼刀在安培瓶上部劃一小痕跡，用無(wú)菌紗布包住安培瓶，兩手分別捏住安培瓶上下兩端，稍向外用力便可打開(kāi)安培瓶。
依據(jù)菌株特性選擇合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件，用無(wú)菌吸管吸適量的液體培養(yǎng)基加到凍干塊上，吹打混勻成懸液，將全部懸液移入含有5ml合適的液體培養(yǎng)基中，將管中殘留的幾滴懸液移種到斜面上，適宜的溫度培養(yǎng)一定的時(shí)間。觀察生長(zhǎng)狀況，可適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間。
2菌株的性能確認(rèn)
2.1純度檢查
菌落形態(tài)取復(fù)活后的培養(yǎng)物，在相應(yīng)的鑒別平板或非選擇平板上劃線(xiàn)分離，培養(yǎng)出單菌落，觀察菌落形態(tài)是否符合該菌株要求，同一平板上的單菌落大小，形狀、顏色、質(zhì)地、光澤是否相似，對(duì)于出現(xiàn)兩種以上形態(tài)的菌株，應(yīng)再分別挑取單菌落劃線(xiàn)，檢測(cè)是否出現(xiàn)相同特征。
2.2細(xì)胞形態(tài)
取劃線(xiàn)平板上的單菌落，革蘭氏染色反應(yīng)應(yīng)符合要求，且呈現(xiàn)一致性。
2.3生化鑒定
必要時(shí)進(jìn)行生化鑒定。
2.4污染處理
如發(fā)現(xiàn)菌株有污染，挑選目標(biāo)菌培養(yǎng)成功后，將培養(yǎng)物滅菌銷(xiāo)毀（121℃30min）。
3菌株的傳代
3.1標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株的制備
標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株是在經(jīng)多次傳代后制備的多份相同的菌株。
將復(fù)活后經(jīng)過(guò)性能確認(rèn)的菌株的斜面培養(yǎng)物，用0.85%的滅菌生理鹽水0.5ml洗斜面菌苔成菌懸液
將上述菌懸液吸入滅菌管中，加入0.5ml40%的滅菌甘油，混勻，密封。保藏溫度為—18℃。
3.2工作菌株的制備
由凍干或超低溫保存的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株經(jīng)一次傳代得到的菌株。工作菌株不宜再傳代，工作菌株使用和儲(chǔ)存過(guò)程中嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，即不存在交叉污染，可以多次使用。保藏溫度為4-6℃。
3.3菌株的保藏
制備好的菌株應(yīng)由室主任統(tǒng)一編號(hào)，標(biāo)識(shí)，專(zhuān)人專(zhuān)柜保藏。