1、安瓿瓶開封:用浸過75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量(2-3滴)無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復培養(yǎng):用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基(液體培養(yǎng)基去掉瓊脂即可),滴入安瓿管內(nèi),使凍干菌粉全部溶劑。將溶解后的菌懸液轉(zhuǎn)移至盛有4-5ml液體培養(yǎng)基的試管中混勻,并取幾滴轉(zhuǎn)接到試管斜面上。將液體試管和斜面試管于推薦條件下靜置培養(yǎng)。
3、注意事項:菌種活化前,請將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài),延遲期較長,需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長。
4、復蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開的安瓿管應于4℃中保藏(特殊除外)。
6、凍干管打開后需一次用完,不能留存。
7、打管操作需由專業(yè)微生物技術人員在相應的防護設備中進行,生物危害程度為三類的菌種應在生物安全柜中操作,打管時凍干管應遠離面部,保護眼睛。
8、打管操作應在燒杯或托盤上方進行,用完凍干管應滅菌處理后丟棄。