膽鹽乳糖培養(yǎng)基的基本原理與實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及操作流程！
小楊 / 2025-08-11 09:21:31
膽鹽乳糖培養(yǎng)基（Bile Salt Lactose Medium，簡(jiǎn)稱 BSL 培養(yǎng)基）是微生物學(xué)中常用的選擇性兼鑒別培養(yǎng)基，主要用于腸道致病菌（如
大腸桿菌等革蘭氏陰性菌）的分離、培養(yǎng)和初步鑒定，尤其適用于水體、食品等樣本中腸道病原菌的檢測(cè)。以下從原理和實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象兩方面詳細(xì)說(shuō)明：
一、培養(yǎng)基原理
1、選擇性成分：膽鹽
作用：膽鹽（如牛膽鹽）是腸道分泌物中的天然成分，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌有較強(qiáng)的抑制作用（可破壞其細(xì)胞壁和細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)），但對(duì)大多數(shù)革蘭氏陰性菌（尤其是腸道桿菌）影響較小。
目的：通過(guò)膽鹽抑制非目標(biāo)菌（主要是革蘭氏陽(yáng)性菌）的生長(zhǎng)，從而選擇性富集革蘭氏陰性菌，提高目標(biāo)菌的分離效率。
2、鑒別成分：乳糖和指示劑（溴甲酚紫或酚紅）
乳糖：作為碳源，腸道中的多數(shù)致病菌（如
大腸桿菌）能產(chǎn)生乳糖酶，可分解乳糖產(chǎn)生有機(jī)酸（如乳酸），而部分非致病菌或其他腸道菌可能不具備此能力。
酸堿指示劑：培養(yǎng)基中通常加入溴甲酚紫（變色范圍 pH 5.2-6.8，酸性呈黃色，堿性呈紫色）或酚紅（變色范圍 pH 6.4-8.0，酸性呈黃色，堿性呈紅色）。當(dāng)細(xì)菌分解乳糖產(chǎn)酸時(shí)，培養(yǎng)基 pH 下降，指示劑變色，以此鑒別是否為乳糖發(fā)酵菌。
3、其他成分
蛋白胨：提供氮源和生長(zhǎng)因子，滿足細(xì)菌生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)需求。
氯化鈉：維持培養(yǎng)基的滲透壓，保證細(xì)菌正常代謝。
二、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象
將待檢測(cè)樣本（如污水、食品勻漿等）接種到膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，經(jīng) 35-37℃培養(yǎng) 18-24 小時(shí)后，根據(jù)培養(yǎng)基的變化判斷結(jié)果：
1、目標(biāo)菌（乳糖發(fā)酵型革蘭氏陰性菌，如大腸桿菌）生長(zhǎng)：
細(xì)菌大量繁殖，培養(yǎng)基可能出現(xiàn)渾濁（菌液濃度增加）。
因分解乳糖產(chǎn)生有機(jī)酸，培養(yǎng)基 pH 降低，指示劑變色：
若用溴甲酚紫：培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S色。
若用酚紅：培養(yǎng)基由紅色變?yōu)辄S色。
部分細(xì)菌可能產(chǎn)氣（分解乳糖產(chǎn)生二氧化碳），若使用試管斜面或帶有倒管的培養(yǎng)基，倒管中會(huì)出現(xiàn)氣泡。
2、非目標(biāo)菌（如革蘭氏陽(yáng)性菌）：
因受膽鹽抑制，通常不生長(zhǎng)或生長(zhǎng)微弱，培養(yǎng)基保持澄清，指示劑無(wú)變色。
3、非乳糖發(fā)酵型革蘭氏陰性菌：
可在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)（不受膽鹽抑制），但因不能分解乳糖，培養(yǎng)基 pH 不變，指示劑保持原有顏色（紫色或紅色），菌液可能渾濁。
三、總結(jié)
膽鹽乳糖培養(yǎng)基通過(guò)膽鹽的選擇性抑菌和乳糖 + 指示劑的發(fā)酵鑒別，可快速篩選出乳糖發(fā)酵型革蘭氏陰性菌（如
大腸桿菌等腸道致病菌），是環(huán)境衛(wèi)生、食品衛(wèi)生檢測(cè)中常用的培養(yǎng)基。實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的核心是“渾濁 + 指示劑變色”（陽(yáng)性）與“澄清或渾濁但指示劑不變色”（陰性）的區(qū)別。
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