微生物菌種甘油保藏的教程解析與操作要點(diǎn)及具體步驟！
小楊 / 2025-04-10 09:30:40
一、甘油保藏教程
1、準(zhǔn)備階段
（1）配制甘油溶液：甘油原液較為粘稠，因此通常將其與水按一定比例混合，形成甘油水溶液。常用的比例為甘油與水1:1，即得到50%的甘油濃度。之后將配制好的甘油水溶液進(jìn)行高壓滅菌處理，以殺滅其中的雜菌，確保無菌狀態(tài)。
（2）準(zhǔn)備菌種：選擇需要保藏的微生物菌種，確保其純度和活性。將菌種接種于適宜的液體培養(yǎng)基中，進(jìn)行培養(yǎng)并制備成菌液。菌液的濃度越大，菌種保存時(shí)間通常越長。
2、混合階段
菌液與甘油混合：在無菌條件下，將滅菌后的甘油水溶液與菌液按一定比例混合。通常，甘油與菌液的體積比為1:1，使甘油終濃度保持在20%~30%之間。這一比例范圍有助于保持菌種的活性和穩(wěn)定性。之后振蕩密封的試管或保藏管，使菌懸液與甘油充分混勻。
3、保存階段
（1）冷凍保存：將混合好的甘油菌種轉(zhuǎn)移至-20℃或-80℃的冰箱中進(jìn)行長期凍存。一般來說，保藏溫度越低，保藏效果越好。目前實(shí)驗(yàn)室大都采用-80℃冰箱進(jìn)行保藏。需要注意的是，冷凍時(shí)應(yīng)保持降溫速率適中，推薦降溫速率為1℃/min，避免過快或過慢對(duì)菌種造成損傷。
（2）取用與復(fù)蘇：需要取用菌種時(shí)，將凍存管從冰箱中取出，放入30℃水浴中快速解凍（注意，某些資料中提到用37℃水浴解凍，但30℃更為常用且安全，以避免高溫對(duì)菌種活性的潛在影響）。解凍過程應(yīng)迅速且避免反復(fù)凍融，以免影響菌種的活性。解凍后，用無菌接種環(huán)蘸取甘油菌懸液，接種到適宜的培養(yǎng)基上進(jìn)行復(fù)蘇和培養(yǎng)。
二、操作要點(diǎn)
1、選擇合適的培養(yǎng)基：
勿使用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行保藏，因?yàn)槲⑸镌谶x擇性培養(yǎng)基中生長時(shí)，某些生物特性可能會(huì)丟失。一般使用非選擇性的增菌培養(yǎng)基進(jìn)行保藏。
2、無菌操作：
在整個(gè)保藏過程中，應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程，包括在無菌環(huán)境下進(jìn)行菌種的接種、培養(yǎng)和甘油混合等操作，以防止雜菌污染。
3、定期檢測：
建議每半年進(jìn)行一次菌種確認(rèn)試驗(yàn)，通過平板劃線分離、觀察菌落形態(tài)、染色鏡檢等常規(guī)實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)菌的存活情況。若有條件，可用菌株生化鑒定試劑盒進(jìn)行確認(rèn)。
4、避免反復(fù)凍融：
取用菌種后，應(yīng)盡量避免對(duì)剩余的甘油菌種進(jìn)行反復(fù)凍融操作，以免影響菌種的活性和穩(wěn)定性。
5、記錄保存信息：
在保存甘油菌種時(shí)，應(yīng)詳細(xì)記錄菌種的名稱、保存日期、甘油濃度、保存溫度等信息，以便后續(xù)取用和管理。
微生物菌種查詢網(wǎng)隸屬于北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司，成立于二〇一四年十月份，是一家專業(yè)提供中國微生物菌種，標(biāo)準(zhǔn)菌種，質(zhì)控菌株,ATCC菌種,細(xì)胞系以及培養(yǎng)基等產(chǎn)品的查詢網(wǎng)站！自成立至今，已提供各類微生物菌種、細(xì)胞、培養(yǎng)基數(shù)量達(dá)四萬余份，接待咨詢客戶數(shù)量5萬余人次，成交合同數(shù)量2萬余份！是國內(nèi)微生物菌種及細(xì)胞信息Z全的網(wǎng)站！ 我們擁有自主研發(fā)能力，提供的ATCC菌種達(dá)15000余份,ATCC各類細(xì)胞系達(dá)3000余份,保藏中心涵蓋菌種資源更達(dá)數(shù)十萬余份！
除此之外，我們還擁有對(duì)菌種、細(xì)胞、培養(yǎng)基、配套試劑等產(chǎn)品需求者的極優(yōu)質(zhì)服務(wù)，對(duì)購買項(xiàng)目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到Z終售后的確保項(xiàng)目準(zhǔn)確到位，都有相關(guān)人士進(jìn)行維護(hù),確保您在中國微生物菌種查詢網(wǎng)中獲得Z優(yōu)質(zhì)服務(wù)！也正因?yàn)榇耍本┌贇W博偉生物技術(shù)有限公司與國內(nèi)外多家研制單位、生物制藥、第三方檢測機(jī)構(gòu)和科研院所院校、化工企業(yè)有著良好、長期和穩(wěn)定的合作關(guān)系！
下載附件
上一篇：人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞的形態(tài)與功能解析及研究應(yīng)用！
下一篇：小鼠小腸上皮細(xì)胞的功能與應(yīng)用及實(shí)驗(yàn)技術(shù)與注意事項(xiàng)！