| 啟動(dòng)子 | GAP |
| 復(fù)制子 | pUC ori |
| 終止子 | AOX1 TT |
| 質(zhì)粒分類 | 酵母系列,畢赤酵母表達(dá)載體 |
| 質(zhì)粒大小 | 3147bp |
| 質(zhì)粒標(biāo)簽 | C-Myc, C-6×His |
| 原核抗性 | Zeo |
| 篩選標(biāo)記 | HIS4 |
| 克隆菌株 | DH5α |
| 培養(yǎng)條件 | 37℃,有氧 LB |
| 表達(dá)宿主 | 酵母細(xì)胞 |
| 5'測序引物 | pGAP-F:GTCCCTATTTCAATCAATTGAA |
| 3'測序引物 | AOX3:GGCAAATGGCATTCTGACAT |
| 質(zhì)粒簡介 |
甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)的酶在許多生物細(xì)胞中包括畢赤酵母,穩(wěn)定高水平表達(dá)。最近GAPDH蛋白編碼基因啟動(dòng)子(GAP)被深入研究,并在畢赤酵母中能夠高水表達(dá)重組蛋白,這取決于使用的碳源(Waterham等 人,,1997)。GAP啟動(dòng)子(PGAP)的重組蛋白表達(dá)水平略高于AOX1啟動(dòng)子。 pGAPZ A,B,和C載體(2.9 KB)和pGAPZαB和C(3.1 KB)載體使用GAP啟動(dòng)子在畢赤酵母中穩(wěn)定表達(dá)重組蛋白。重組蛋白表達(dá)為為帶有C-末端myc抗原表位和C端His標(biāo)簽的融合蛋白。此外,pGAPZα 表達(dá)的融合蛋白在N-端帶有釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的α-因子分泌信號(hào)肽。這兩個(gè)系列的載體都提供三個(gè)不同讀碼框的載體,以方便克隆的帶有C-端標(biāo)簽和/或N-末端分泌信號(hào)肽的載體中。 |