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基本信息
別稱: pET22b
啟動子: T7
復(fù)制子: pBR322
終止子: T7 terminator
質(zhì)粒分類: 大腸系列質(zhì)粒；大腸表達(dá)質(zhì)粒；pET系列質(zhì)粒
質(zhì)粒大小: 5493bp
質(zhì)粒標(biāo)簽: N-pelB，C-6×His
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培養(yǎng)條件: 37度
表達(dá)宿主: 大腸桿菌BL21(DE3)
培養(yǎng)條件: 37℃，有氧，LB
誘導(dǎo)方式: IPTG或乳糖及其類似物
5'測序引物: T7（TAATACGACTCACTATAGGG）
3'測序引物: T7-ter（TGCTAGTTATTGCTCAGCGG）
質(zhì)粒屬性
載體宿主： 大腸桿菌
載體用途： 蛋白表達(dá),分泌表達(dá)
基因種屬： 空載體
基因類型： ORF
原核抗性： Amp
真核抗性：
熒光蛋白：
質(zhì)粒簡介
        pET-22b質(zhì)粒是一種原核表達(dá)載體，N端含有一個pelB前導(dǎo)肽、C-端的His標(biāo)簽。該質(zhì)粒含有多個常用的酶切位點，便于不同基因克隆。表達(dá)由宿主細(xì)胞提供的T7 RNA聚合酶誘導(dǎo)，目的基因被克隆到質(zhì)粒載體上，受噬菌體強轉(zhuǎn)錄及翻譯信號控制。T7 RNA聚合酶啟動的克隆和表達(dá)區(qū)域在質(zhì)粒圖譜中也被標(biāo)注了出來。質(zhì)粒的F1復(fù)制子是被定向的，所以在T7噬菌體聚合酶的作用下，包含有蛋白編碼序列的病毒 粒子能夠產(chǎn)生，并啟動蛋白表達(dá)，同時蛋白表達(dá)將被T7終止子序列的作用下終止蛋白翻譯。
        pET系統(tǒng)是有史以來在大腸桿菌中表達(dá)重組蛋白的功能最強大的系統(tǒng)，也是現(xiàn)今原核表達(dá)方面使用最廣泛的系統(tǒng)。該系列質(zhì)粒能很容易的通過降低誘導(dǎo)物的濃度來削弱蛋白表達(dá)。在非誘導(dǎo)條件下，可以使目的基因處于完全沉默狀態(tài)而不轉(zhuǎn)錄。