基本信息
啟動(dòng)子: T7/lac
復(fù)制子: ColE1 ori，F(xiàn)1 ori
終止子: T7 terminator
質(zhì)粒分類: 大腸桿菌載體；PET系列表達(dá)質(zhì)粒
質(zhì)粒大小: 5933bp
質(zhì)粒標(biāo)簽: N-GST, N-6×His, N-Thrombin
原核抗性: 卡那霉素Kan
克隆菌株: DH5α
培養(yǎng)條件: 37℃，有氧，LB
表達(dá)宿主: BL21(DE3)
誘導(dǎo)方式: IPTG或乳糖及其類似物
5'測序引物: T7:TAATACGACTCACTATAGGG
3'測序引物: T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG
質(zhì)粒簡介
pET41系列載體是設(shè)計(jì)用來克隆和高水平表達(dá)蛋白質(zhì)的載體，載體融合表達(dá)一個(gè)含有220個(gè)氨基酸的GST標(biāo)簽蛋白純化片段。pET41a載體的單一的多克隆位點(diǎn)見上面的環(huán)狀質(zhì)粒圖譜。注意：載體序列是以pBR322質(zhì)粒的編碼規(guī)矩進(jìn)行編碼的，所以T7蛋白表達(dá)區(qū)在質(zhì)粒圖譜上面是反向的。
T7 RNA聚合酶啟動(dòng)的克隆和表達(dá)區(qū)域在質(zhì)粒圖譜中也被標(biāo)注了出來。質(zhì)粒的F1復(fù)制子是被定向的，所以在T7噬菌體聚合酶的作用下，包含有蛋白編碼序列的病毒 粒子能夠產(chǎn)生，并啟動(dòng)蛋白表達(dá)，同時(shí)蛋白表達(dá)將被T7終止子序列的作用下終止蛋白翻譯。pET-41a載體上面含有一個(gè)EK蛋白酶切位點(diǎn)，當(dāng)將目的基因使用載體上面的PshAI限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)插入進(jìn)去時(shí)，可以通過EK蛋白酶將載體上的融合的所有氨基酸序列包括GST標(biāo)簽序列，
