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    PET41a(+)/pET-41a
  • 平臺(tái)編號(hào):bio-00834
  • 質(zhì)粒信息: 宿主:DH5α,BL21
  • 規(guī)格:2mL甘油菌 20ul質(zhì)粒
  • 服務(wù)費(fèi)用:
    加載中……
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  • 注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn))

啟動(dòng)子 T7/lac
復(fù)制子 ColE1 ori,F(xiàn)1 ori
終止子 T7 terminator
質(zhì)粒分類(lèi) 大腸桿菌載體;PET系列表達(dá)質(zhì)粒
質(zhì)粒大小 5933bp
質(zhì)粒標(biāo)簽 N-GST, N-6×His, N-Thrombin
原核抗性 卡那霉素Kan
克隆菌株 DH5α
培養(yǎng)條件 37℃,有氧,LB
表達(dá)宿主 BL21(DE3)
誘導(dǎo)方式 IPTG或乳糖及其類(lèi)似物
5'測(cè)序引物 T7:TAATACGACTCACTATAGGG
3'測(cè)序引物 T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG
質(zhì)粒簡(jiǎn)介 pET41系列載體是設(shè)計(jì)用來(lái)克隆和高水平表達(dá)蛋白質(zhì)的載體,載體融合表達(dá)一個(gè)含有220個(gè)氨基酸的GST標(biāo)簽蛋白純化片段。pET41a載體的單一的多克隆位點(diǎn)見(jiàn)上面的環(huán)狀質(zhì)粒圖譜。注意:載體序列是以pBR322質(zhì)粒的編碼規(guī)矩進(jìn)行編碼的,所以T7蛋白表達(dá)區(qū)在質(zhì)粒圖譜上面是反向的。
       T7 RNA聚合酶啟動(dòng)的克隆和表達(dá)區(qū)域在質(zhì)粒圖譜中也被標(biāo)注了出來(lái)。質(zhì)粒的F1復(fù)制子是被定向的,所以在T7噬菌體聚合酶的作用下,包含有蛋白編碼序列的病毒 粒子能夠產(chǎn)生,并啟動(dòng)蛋白表達(dá),同時(shí)蛋白表達(dá)將被T7終止子序列的作用下終止蛋白翻譯。pET-41a載體上面含有一個(gè)EK蛋白酶切位點(diǎn),當(dāng)將目的基因使用載體上面的PshAI限制性?xún)?nèi)切酶位點(diǎn)插入進(jìn)去時(shí),可以通過(guò)EK蛋白酶將載體上的融合的所有氨基酸序列包括GST標(biāo)簽序列, 

  

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