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大鼠胰腺beta細(xì)胞大鼠胰島素瘤細(xì)胞

平臺編號：bio-137169
細(xì)胞信息： RIN-5F
規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
服務(wù)費(fèi)用及說明書：
加載中……
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注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn)）

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產(chǎn)品類別：大鼠細(xì)胞系生長特性：表皮細(xì)胞

培養(yǎng)體系：專用培養(yǎng)基

傳代方法：1:2

細(xì)胞形態(tài)：貼壁凍存條件：無血清凍存液

1. 請立即檢查包裝袋是否有破損或漏液

2. 請立即將細(xì)胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出，并按照下方操作步驟進(jìn) 行培養(yǎng)傳代

注意：如為凍存管，請收到后立即解凍培養(yǎng)。若來不及解凍，請儲存于液氮中（存儲于負(fù)80度，會降低細(xì)胞存活率）對于貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，寄送前，我們會將培養(yǎng)基充滿整個培養(yǎng)瓶，以減少產(chǎn)品運(yùn)輸過程中貼壁細(xì)胞的脫落。

1. 收到細(xì)胞產(chǎn)品后，請注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細(xì)檢查是否渾濁、是否細(xì)菌污染。因在運(yùn)輸過程中存在顛簸，且有些細(xì)胞對溫度變化也很敏感，可能存在一些細(xì)胞脫落漂浮的情況，這些細(xì)胞仍是活細(xì)胞，請勿丟棄，可離心富集后傳代使用。

2. 對于貼壁的細(xì)胞，在生物安全柜環(huán)境中，用真空泵去除培養(yǎng)瓶中的多余培養(yǎng)基，至剩余5-8mL左右，隨后將細(xì)胞置于含有5%CO2 的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，擰松瓶蓋。如果細(xì)胞已經(jīng)長滿培養(yǎng)瓶請立即傳代。

3. 對于懸浮的細(xì)胞，在生物安全柜環(huán)境中，轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞至離心管中，離心200×g / 5 - 10 min，去除上清后，用5 mL培養(yǎng)基吹散細(xì)胞，轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，隨后置于含有5% CO2 的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

凍存細(xì)胞操作步驟

注意：為保存細(xì)胞的高存活率，請收到產(chǎn)品后，立即解凍培養(yǎng)。

1.將凍存管置于37℃ 水浴中來回晃動，迅速解凍。為避免污染，確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速，大約2分鐘。

2. 一旦凍存管中液體融化后，立即取出，采用 70%酒精噴拭凍存管表面。從此步開始，后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。

3.將凍存管中的液體轉(zhuǎn)移到含有5mL完全培養(yǎng)基的離心管中，離心200×g / 5 - 10 min，用真空泵去除含有凍存液的上清。

4. 用完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細(xì)胞復(fù)蘇的存活率，請將培養(yǎng)基在37℃水浴預(yù)熱后使用。

5. 將細(xì)胞置于含有5%CO2 的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)

1. 吸取并棄掉培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基，加入PBS洗滌一次。

2. 加入 1.0 mL 0.25（w/v）Trypsin-0.53mM EDTA溶液，并置于37 ℃培養(yǎng)箱中孵育，直至細(xì)胞從壁上脫落分離。此過程大約需要3 至5分鐘（此處為12.5 cm2 培養(yǎng)瓶所用體積，可根據(jù)實(shí)際情況增減用量）。

3. 加入2mL完全培養(yǎng)基中和胰蛋白酶，并輕輕吹打?qū)⒓?xì)胞從培養(yǎng) 瓶表面吹落，并使細(xì)胞分散。

4. 離心200x g/5 min，去除上清后，取適量的培養(yǎng)基將細(xì)胞重懸, 取適量懸液置于新的培養(yǎng)瓶中，并加入新鮮細(xì)胞完全培養(yǎng)基至總體積為4mL。

5. 將細(xì)胞置于含有5%CO2 的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。傳代比例：建議 1:2 至 1:3（以培養(yǎng)瓶底面積計算）培養(yǎng)基換液: 每隔 2 至 3 天。

固定電話：010-53515223

業(yè)務(wù)手機(jī)：18610886853,18610241664,18701099593,18971386853,18701098095

微信號碼：vrmte521（18610886853企業(yè)微信）；18610241664；biobw0905（18701098095）

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官方郵箱：biobw11@sina.com（微生物菌種查詢網(wǎng)）

投訴電話：biobw8888（18701099593）

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