微生物的分離、純化及培養(yǎng)技術(shù)
微生物菌種查詢網(wǎng) / 2015-12-25 09:43:46
微生物的分離、純化及培養(yǎng)技術(shù)
分離與純化：從混雜的微生物群體中獲得只含某一種或某一株微生物的過(guò)程。
為什么要進(jìn)行純培養(yǎng)：平板上的單一菌落并不一定保證是一種菌。
常用的分離、純化方法：
單細(xì)胞挑取法 稀釋涂布平板法
稀釋混合平板法 平板劃線法
稀釋涂布平板法 ：
步驟：
1、倒平板： 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，高氏I號(hào)培養(yǎng)基，查氏培養(yǎng)基冷卻至55-60℃時(shí)，混勻后倒平板，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒4皿，高氏I號(hào)培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基各倒3皿。
2、制備污水稀釋液：10g土樣，加入90ml無(wú)菌水中，在三角瓶中振搖20min。取0.5ml 加入盛有4.5ml無(wú)菌水的試管中，以此類推，制成不同稀釋度。
3、涂布：將上述每種培養(yǎng)基平板底面標(biāo)記稀釋度，然后用無(wú)菌吸管從最后三種稀釋度，即10-4、10-5和10-6的試管中吸取0.1ml對(duì)號(hào)放入平板上，用玻棒涂布。
4、培養(yǎng)：高氏I號(hào)和查氏倒置培養(yǎng)于28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3-5days，牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基在37℃培養(yǎng)1-2days。
5、挑菌落：轉(zhuǎn)至斜面，檢查是否一致，保存。
平板劃線法：
1、倒平板，標(biāo)記培養(yǎng)基名稱，編號(hào)和實(shí)驗(yàn)日期。
2、劃線方法
稀釋混合平板法 ：
1、先加菌
2、倒平板時(shí)注意培養(yǎng)基溫度
3、混合均勻
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